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磷酸葡萄糖异构酶(PGI)/磷酸己糖异构酶(PHI)试剂盒,

微板法
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  • ￥2090
  • wksubio
  • WS8680W
  • 国内
  • 2026年02月03日
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    上海瓦兰生物科技有限公司
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    • 英文名：

      Phosphoglucose Isomerase (PGI)/Phosphoglucose Isomerase (PHI) Kit

    • CAS号：

      WS8680W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
    磷酸葡萄糖异构酶（glucose-6-phosphate isomerase）试剂盒说明书
    （货号：WS8680W 微板法 96 样）
    一、产品简介：
    磷酸葡萄糖异构酶（
    PGI，EC 5.3.1.9）能催化 6-磷酸果糖与 6-磷酸葡萄糖的相互转化，
    是呼吸作用中参与糖酵解途径的一种重要的胞内酶。
    磷酸葡萄糖异构酶（
    PGI）催化6-磷酸果糖生成6-磷酸葡萄糖，接着在磷酸葡萄糖脱氢
    酶的作用下，使NADP +还原成NADPH，通过检测在340nm处的上升量来计算PGI酶活大小。
    二、试剂盒组成和配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 100mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    粉剂 mg×1 支
    4℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部，再
    加 1.1mL 蒸馏水充分溶解备用。
    试剂二
    粉剂 mg×1 支
    -20℃保存
    临用前甩几下使试剂落入底部，再
    加 1.1mL 的蒸馏水溶解备用。
    试剂三
    液体 15mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂四
    粉剂 mg×1 支
    -20℃保存
    临用前甩几下使粉剂落入底部，再
    加 1.1mL 蒸馏水充分溶解备用。
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
    四、磷酸葡萄糖异构酶（
    PGI）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000rpm 4℃离心 10min，取上
    清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例提取
    ②细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取
    液；超声波破碎细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000rpm
    4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    2、上机检测：
    ① 酶标仪预热 30min 以上，设置温度 30℃，调节波长至 340nm。
    ② 试剂放在 30℃水浴 5min；
    ③ 在 96 孔板中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    样本
    20
    试剂一
    10
    试剂二
    10本试剂盒仅供科研使用
    2
    试剂三
    150
    混匀，30℃下孵育 10min
    试剂四
    10
    混匀，30℃下，立即于 340nm 处读取吸光值
    A1，10min 后读取 A2，△A=A2-A1。
    【注】：1.若ΔA 过小，可以延长反应时间（如：20min 或更长）再读取 A2，或增加样本加样量 V1（如
    增至 40μL，则试剂三相应减小），重新调整的反应时间 T 和 V1 需代入计算公式重新计算。
    2.若起始值 A1 太大如超过 2（如颜色较深的植物叶片，一般色素较高，则起始值相对会偏高），
    可以适当减少样本加样量 V1，则改变后的加样体积 V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、按样本蛋白浓度计算：
    单位定义：每毫克组织蛋白每分钟生成 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
    PGI(nmol/min/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷(V1×Cpr)÷T=321.5×ΔA÷Cpr
    2、按样本鲜重计算：
    单位定义：每克组织每分钟生成 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
    PGI(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷(W×V1÷V)÷T=321.5×ΔA÷W
    3、按细胞数量计算：
    单位定义：每 1 万个细胞每分钟生成 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
    PGI(nmol/min/104 cell)=[ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.643×ΔA
    ε---NADPH 摩尔消光系数，6.22×103 L/mol/cm；
    d---96 孔板光径，0.5cm；
    V---加入提取液体积，1 mL；
    V1---加入样本体积，0.02mL；
    V2---反应体系总体积，2×10-4 L；
    T---反应时间，10 min；
    W---样本质量，g；
    500---细胞数量，万；
    Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。

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      ，它可检索弱同源的目标；PHI-BLAST 98年刚出台，是模体（Motif ）构造与搜索软件，是更灵敏的同源搜索软件。例如线虫的CED4是apoptosis 的调控蛋白，含有涉及磷酸结合的P 环模体，在各种ATP 酶和GTP 酶中可发现。在用gapped BLAST搜索NR数据库时，CED4仅跟人凋亡调控蛋白Apaf-1显著同源或相似（其中含有P-loop保守区）。但PHI- BLAST搜索，另有一个显著同源（E=0.038 ）目标，是植物抗病蛋白Arabidopsis thaliana T

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