- ￥800
- xybio
- 详见说明书
- XYB2148A
- 上海
- 2026年01月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存：
100
- 样本：
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物：
HRP标记
- 适应物种：
牛
- 应用：
仅供科研
- 检测方法：
双抗夹心
- 检测范围：
详见说明书
- 规格：
48T
牛磷酸烯醇式丙/酮酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
6.有效期：6个月
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文献和实验Nat Immunol：华中科技大学黄波团队揭示记忆性 T 细胞通过氨解毒促进记忆形成的机制
细胞维持长寿命的原因，依然是困扰免疫学家的一大难题。黄波课题组长期致力于揭示记忆性 T 细胞维持长寿命的关键代谢特征，2018 年课题组发现记忆性 T 细胞的长期存活与糖异生-糖原代谢这种独特的代谢模式有关，Tm 通过高表达糖异生途径的关键限速酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 PCK1 而促进糖原的合成，又通过磷酸戊糖途径产生还原型 NADPH，维持高水平的还原性谷胱甘肽，及时清除胞内的氧自由基，从而维持记忆性 T 细胞的长期存活。Tm 由效应性 T 细胞衍生而来，二者为何 PCK1 的表达发生差异？该课题
）。C4植物的BSC中含有大而多的叶绿体，线粒体和其它细胞器也较丰富。BSC与相邻叶肉细胞间的壁较厚，壁中纹孔多，胞间连丝丰富。这些结构特点有利于MC与BSC间的物质交换，以及光合产物向维管束的就近转运。 此外，C4植物的两类光合细胞中含有不同的酶类，叶肉细胞中含有磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)以及与C4二羧酸生成有关的酶；而BSC中含有Rubisco等参与C3途径的酶、乙醇酸氧化酶以及脱羧酶。在这两类细胞中进行不同的生化
，两个月内试剂的空白吸光度几乎无变化，也即每两个月采用标准液校准一次完全不会影响临床标本结果的标准性。 2.5 标准曲线 按本法测定，二氧化碳浓度在（0－45）mmol/l范围内线性良好，回归方程和相关系数分别为Y=0.975x+0.755(x为理论值，y为测定值)，相关系数为0.9855。 2.6方法比较 本法（y）与磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶法（PEPC）单试剂（x）回归方程为y=0.251+0.992x,r=0.985,n=40, 经配对t检验，p＞0.05，两者无显著性差异
