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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Lignin Content Kit
- CAS号:
WS8070F
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海瓦兰生物
- 保存条件:
4℃
- 规格:
48T
本试剂盒仅供科研使用
木质素含量测定说明书
(货号:WS7170F 紫外法 48 样)
一、产品简介:
木质素是一种含有羟基和甲氧基的高分子芳香族化合物,是苯丙烷的衍生物,作为植物
的化学成分与纤维素及半纤维素共同形成植物体骨架,大大提高了细胞壁的机械强度,为
植物提供支持,适应环境,抗虫病害和抗倒伏的生理功能,同时,在木质素合成过程中产
生的一些前体物质酚类和自由基可以破坏原菌相关酶类的生物活性与细胞膜的通透性,从
而使植物有一定的自我防御能力。
本试剂盒采用乙酰化法,使木质素中的酚羟基发生乙酰化,其在280nm处有特征吸收峰,
280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。
二、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 40mL×1 瓶
4℃保存
该试剂具有强挥发性和一定
的毒性,注意在通风橱操作
并且每次用完需密封保存。
试剂二
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
三、所需的仪器和用品:
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿(光径 1cm)、低温离心机、水浴锅、移液器、冰
乙酸。
四、木质素含量的测定:
1、样本制备:
① 取适量组织样本烘干并磨碎,过 40 目筛备用;取 2mg 过筛的粉末组织,加 1.5mL
的 80%乙醇,涡旋振荡混匀,50℃水浴 20min(间隔 3min 晃动几下),取出流水冷
却后,12000rpm,25℃10min,弃上清,留沉淀(尽量保留沉淀)。
② 向沉淀中加入 1mL 的 80%乙醇震荡混匀 2min,50℃水浴 20min(间隔 3min 晃动几
下),取出流水冷却后,12000rpm,25℃10min,弃上清,留沉淀(尽量保留沉淀),
95℃烘干沉淀,待用。
2、上机检测:
① 紫外分光光度计预热 30 min,设置温度在 25ºC,设定波长到 280nm,蒸馏水调零。
② 选用螺旋盖式 2mL 的 EP 管,按照下表加样:
试剂(
μL)
测定管
空白管
样本制备得到的沉淀
试剂一
(沿管壁缓缓加入)
750
750
混匀,70℃水浴 30min(管口用封口膜封紧或者用重物压实),隔
15min 轻轻震荡一次,结束后自然冷却至室温。
(整个操作过程,谨慎操作,注意防护)
试剂二
(沿管壁缓缓加入)
300
300
乙酸
450
450本试剂盒仅供科研使用
2
【注】1.若是木本植物也可考虑添加高氯酸进行乙酰化,即样本制备得到的沉淀+750μL
试剂一+30μL 高氯酸(也需缓慢加入,谨慎操作),充分混匀,70℃水浴 30min
(整个操作过程同上),加 300μL 试剂二和 420μL 乙酸,总体积仍为 1.5mL,
后续操作过程同上。
2.若 A 测定管大于 1.8,在最后一步用比色皿检测时:取 80μL 澄清上清
液+720μL 乙酸至 1mL 石英比色皿(光径 1cm)中(空白管也一样操作),则
上清液相当于稀释了 10 倍,则计算公式中的 10 替代 4 参与计算。
五、结果计算:
1、标准曲线方程:y = 17.853x - 0.0029;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为ΔA。
2、按样本重量计算:
木质素(mg/g 重量)=[(ΔA+0.0029)÷17.853]×V1÷W×4
=0.084×(ΔA+0.0029)÷W×4
V1---定容后总体积,1.5mL;
4---至比色皿中检测时上清液稀释倍数;
W---样本重量,1.5mg=1.5×10-3g。
振荡充分混匀,总体积为 1.5mL(即为待检混合液)。
注:由于冰乙酸易挥发,请混匀后立即测定!
室温下 5000rpm 离心 5min,取 200μL 澄清上清液于 1mL 石英比色皿
(光径 1cm)中,再加 600μL 乙酸至石英比色皿中,于 280nm 下读
取吸光值 A。ΔA=A 测定管-A 空白管。
注:由于冰乙酸易挥发,可每次测定 1 个样本。
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文献和实验相关实验
由聚合的芳香醇构成的一类物质,存在于木质组织中,主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁。木质素主要位于纤维素纤维之间, 起抗压作用。在木本植物中,木质素占25%,是世界上第二位最丰富的有机物(纤维素是第一位)。
一种分子很大的、具三维结构的芳香族高聚物。由对 -香豆醇、松柏醇和芥子醇脱氢聚合而成。因植物年龄和种类不同,这 3种组分的相对量变化也很大,所以木质素不是一种,而是有多种。它主要存在于木质部中,是木质部中各部分细胞壁,特别是次生壁的组分,填充在细胞壁的纤维素微纤丝周围的基质中,增加机械强度。它是木材的主要成分。用间苯三酚和盐酸染色时,呈现鲜红色。正常状况下为棕色。
存在于维管束中,木材中含量达 20— 30%。化学构造如图所示,是以 3种类苯丙烷(Ⅰ—Ⅲ)为构成单位的复杂聚合的枝状构造。在天然情况下与纤维素和其它糖类结合在一起,充填在细胞壁的纤维素胶囊中,起着强固组织的作用。从导管、假导管、纤维初生壁角开始堆积木素,并向中部、细胞间隙扩展,这一过程称为木素化。随着木素的堆积,其甲氧基含有率增加,达到一定量时,细胞壁停止增厚,木素化完毕。木素生成过程一般与类苯丙烷的生物合成相同,芳香族氨基酸特别是苯丙氨酸脱氨
技术资料木质素( Lignin)含量试剂盒
¥620









