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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
91
- 英文名:
/
- 保质期:
1年
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T
产品名称:转基因构建35S启动子-GUS基因探针法qPCR试剂盒
产品规格:50T
保存及有效期:请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:样品模板

产品特点:
1. 一站式,用户不需要单独准备每种成分,包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物,具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术,RT 和 PCR 两步在一个试管内完成,不需要中间 转移样品,降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研,不能用于临床。
转基因构建35S启动子-GUS基因探针法qPCR试剂盒包装规格及成分(具体信息详见说明书):
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 说明书 |
使用手册 | 1 份 |
转基因构建35S启动子-GUS基因探针法qPCR试剂盒注意事项:
1.所有操作严格按照说明书进行;
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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文献和实验源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
和 Rubi3 [ 67, 68 ],以及从甘蔗中分离出的 ubi4 和 ubi9 [ 69 ] 启动子,所有这些启动子的表达活性与玉米 Ubil 或 CaMV35S 相当甚至更高。玉米 Ubil 驱动 GtAS 基因在转基因拟南芥、番茄、烟草和松树的根中也获得了很好的表达[70]。 Actin 基因的启动子是可以替代泛素的另一个理想启动子。水稻 Actin 启动子 ( Actl- D) 由 Act1 基因翻译起始密码子上游 2.1 kb 的一段序列组成。该序列包含了 GUS 高水平表达
,在CaMV35S启动子调控下,Gus基因的表达未见增强;当把内含子置于Gus基因3端,在同样的启动子控制下,Gus基因的表达水平却增加了大约3倍。由此可见,内含子对基因表达的作用机制可能是很复杂的,如何利用内含子构建高效植物表达载体,目前还缺乏一个固定的模式,值得进一步探讨。 7 多基因策略 迄今为止,多数的遗传转化研究都是将单一的外源基因转入受体植物。但有时由于单基因表达强度不够或作用机制单一,尚不能获得理想的转基因植物。如果把两个或两个以上的能起协同作用的基因同时转入植物,将会获得
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