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✓ 无血清,不含异源动物成分,化学成分限定培养基;
✓ 支持多种悬浮293细胞的快速扩增和高密度生长;
✓ 维持多种悬浮293细胞较长周期的高活率生长;
✓ 支持悬浮体系下的高效转染、病毒(慢病毒、腺相关病毒等)包装、蛋白表达;
✓ 按照GMP标准生产和管理,支持IND和商业化。
性能:

应用:
适用于从人外周血单个核细胞(PBMC)、脐带血单个核细胞中选择性扩增NK细胞。
应用于NK细胞疗法开发,如CAR-NK等。
Q&A
OptiVitro® NK细胞无血清培养基-常见问题
1. 冻存的PBMC细胞可以用吗?
冻存的PBMC细胞可以使用,但是培养效果明显弱于新鲜PBMC。对于冻存的PBMC,建议激活前一天进行静息,即将细胞加入到含有NK培养基、不含包被因子的培养瓶中,放入培养箱过夜再进行激活。
2. 不加血浆效果如何?
扩增效果下降,对于初始NK较低的可能效果更差。
3. 人AB血清能否代替血浆?
可以。
4. 可以支持的细胞培养密度?
培养瓶培养建议4-5 E6/ml ; 袋子建议最高3-4 E6/ml(密度高影响生长,不同培养袋可能表现不同)。
5. 通用型NK客户无法使用血浆怎么办?
可选择NK比例较大的donor。
6. 高分选NK的客户能否使用?
完全可以,应提高血浆比例至5%,接种密度可以适当降低,接种密度范围:0.5-2x10^6 cells/mL。
7. iPS-NK客户能否使用?
有客户使用基础培养基(N012)搭配自有平台因子成功培养iPS-NK 。
8. 培养皿/培养瓶是否需要TC-treated?
需要。
9. 能否使用滋养层细胞?
可以,滋养层细胞可替代细胞因子I和II, 对于某些滋养层细胞,可加IL-2使用,某些滋养层细胞不能单纯加IL-2,仍然需要其他细胞因子,我们有扩增基础试剂盒可以使用。
10. 激活后NK细胞扩增试剂盒P01提供的培养基不够怎么办?
NK细胞扩增基础试剂盒P01(NE000-N032)含有基础培养基、添加组分和细胞因子III,支持细胞扩增,与NK细胞扩增试剂盒P01(NE000-N022)配合使用。
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文献和实验基金项目:本课题受国家“九五”重点攻关课题(96-960A-01-20)和黑龙江省重点攻关课题(G00C190401)资助 【摘要】 目的 研究多方面比较无血清培养基AIMV与完全培养基对体外细胞因子激活的NK细胞的支持作用。方法 分别用AIMV及完全培养基培养粘附NK细胞(A-NK)和非粘附NK细胞(NA-NK),比较细胞的增殖能力、杀伤肿瘤细胞的能力、表达粘附分子CD11 c
-free Medium无血清培养基(Serum Free Medium, SFM)是由世界著名的美国LONZA公司生产。该12-725F UltraCULTURE Serum-free Medium无血清培养基是一种营养成分完全的通用型的无血清培养基,适用于培养贴壁哺乳动物细胞和悬浮哺乳动物细胞;适于在疫苗生产中制备病毒颗粒;支持杂交瘤形成时的细胞融合,支持单核细胞、巨噬细胞、上皮细胞和成纤维细胞系的细胞生长。适合多种细胞类型的无血清培养,包括HeLa细胞、HEC细胞、HEL,N-10细胞、HNK细胞
C 孵育 20 分钟,期间进行连续搅拌,如果是在静置条件下孵育中间进行几次吹打混匀,该孵育时间可适当延长。孵育结束制备得到 CD3/CD28 Streptamer® 混合物; 2. 用培养基(成分:RPMI1640 + 10% 血清 + 50U/ml IL-2 )调整细胞浓度至 5×10^5/ml,将步骤(1)中制备好的 CD3/CD28 Streptamer® complexes 与细胞悬液进行混合,轻轻吹匀后,将细胞加入到细胞培养板中,放置于 37°C 含 5% CO2 细胞培养箱中培养
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