NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞

NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞：
细胞详述

该细胞系是由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事从一名58岁白色男性吸烟肺癌患者治疗前获得的。 这是一种亚三倍体人类细胞系，其模态染色体数出现在 68% 的计数细胞中。多倍体细胞发生率为 3.0%；所有细胞共有 11 条标记染色体，其中两条是配对的。标记包括：der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、配对 der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1) 和 der( 16)t(16;?)(q24;?) 和其他六个；正常 Y、N13、N15 和 N16 不存在；X染色体大多是成对的。这些细胞携带 TP53 基因密码子 191 的突变。细胞不能合成肽神经调节蛋白 B (NMB) 或胃泌素释放肽 (GRP)。细胞对角蛋白和波形蛋白染色呈阳性，但对神经丝三联体蛋白呈阴性。

细胞特性：

1） 来源：肺  腺癌；非小细胞肺癌；第二阶段   

2） 形态：上皮细胞样   贴壁、单细胞和松散附着的簇

3） 含量：>1x106  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。



2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。



3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。



4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。


NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核