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淀粉分支酶(SBE)试剂盒,微板法

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  • ￥1290
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  • WS9350W
  • 国内
  • 2025年07月10日
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    • 英文名：

      Starch branching enzyme (SBE) kit

    • CAS号：

      WS9350W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    淀粉分支酶（Starch branching enzyme，SBE）试剂盒说明书
    （货号：WS9350W 微板法 48 样）
    一、产品简介：
    淀粉分支酶（SBE，EC 2.4.1.18）是参与支链淀粉合成的关键酶之一，在淀粉生物合
    成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
    SBE 可使底物含量减少，从而降低底物与碘显色剂形成的在 660nm 有最大吸收峰的蓝
    色复合物，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映 SBE 酶活性的大小。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 15mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    粉体 mg×1 瓶
    4℃保存
    临用前甩几下，使试剂落入底部，先加
    1mL 蒸馏水混合均匀，再徐徐加入煮沸
    （95℃）的蒸馏水 5mL，继续煮沸 2min，
    呈透明溶解状态，待冷却后使用。
    试剂三
    液体 40mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂四
    液体 2mL×2 支
    4℃保存
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
    四、淀粉分支酶（SBE）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。 4℃×12000rpm 离心 10min，
    取上清，置冰上待测。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
    2、上机检测：
    ① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 660nm。
    ② 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管
    样本
    10
    10
    （95℃煮沸 10min 的酶液）
    试剂一
    100
    100
    试剂二
    50
    50
    37℃孵育 10min，沸水浴 2min，流水冷却至室温。
    试剂三
    400
    400
    试剂四
    20
    20
    混匀，显色 10min 后，取出 200μL 至 96 孔板中，于 660nm 处读取
    吸光值 A，ΔA＝A 对照管-A 测定管（每个测定管需设一个对照管）。
    【注】若ΔA 差值较小，可加大样本量。则改变后的加样量 V1 需重新代入公式计算。
    五、结果计算：
    1、按照蛋白浓度计算：
    酶活定义：以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示，每毫克蛋白每降低 1％碘蓝值为本试剂盒仅供科研使用
    一个酶活性单位。
    SBE 活性(U/mg prot)= ΔA /A 对照管×100%÷（V1×Cpr）=100×ΔA /A 对照管÷Cpr
    2、按照样本鲜重计算：
    酶活定义：以波长 660nm 的吸光度下降百分率表示，每克组织每降低 1％碘蓝值为一
    个酶活性单位。
    SBE 活性(U/g 鲜重)= ΔA /A 对照管×100%÷(W×V1÷V)= 100 ×ΔA /A 对照管÷W
    V---加入提取液体积，1 mL；
    V1---加入样本体积，0.01mL；
    W---样本质量，g；
    Cpr---样本蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
    2

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