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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
石膏样小孢子菌PCR试剂盒
- 库存:
大量
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增石膏样小孢子菌,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 石膏样小孢子菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 石膏样小孢子菌 PCR 阳性对照(1×10E8 /μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 DNA。
石膏样小孢子菌PCR试剂盒
使用方法
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 石膏样小孢子菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 石膏样小孢子菌PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(石膏样小孢子菌PCR阳性对照1000倍稀释液 | -- |
-- |
18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应(35个循环) | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验名称:实验动物真菌监测标准操作规程(SOP)关键词:实验动物真菌监测目的:规范实验动物真菌监测的具体过程,确保监测结果可靠。主体内容:引起实验动物皮肤真菌病的病原菌,主要是石膏样毛癣菌、石膏样小孢子菌和羊毛状小孢子菌三种,这三种菌的检查是实验动物真菌学监测的核心内容。不论是从动物皮肤病灶处,或是从非病灶处分离出这三种菌,均视为异常。因为非病灶处的真菌很可能随后引起实验动物真菌感染,同时对饲养和实验人员构成威胁。1.检测程序动物皮毛、鳞屑↓沙氏培养基斜面↓ 28℃,7~14d菌落观察↓涂片镜检↓
观察1. 菌丝的形态(1)梳状菌丝:菌丝一侧有多数短的分枝,间距不等,形如梳子,故名梳状菌丝常见于许兰氏毛菌。(2)螺旋状菌丝:某些菌丝呈螺旋状弯曲,常见于石膏样小孢子菌和许兰氏毛菌。(3)球拍样菌丝:在菌丝分节处一端膨大,如网球拍样,常见于小孢子菌(microsporum)及表皮癣菌(epidermophyton)。(4)结节状菌丝:菌丝缠绕成结节样,常见于奥杜盎小孢子菌等。(5)鹿角状菌丝:菌丝末端膨大成鹿角状,多见于许兰氏毛菌。(6)假菌丝:酵母菌(如:白假丝酵母菌)的菌体细胞延长分枝后并不脱落,形成
的病原菌:农村主要是许兰氏毛癣菌、断发毛癣菌等;城市为堇色毛癣菌,铁锈色癣菌等。手足癣、体癣股癣及甲癣的病原菌以红色毛癣菌最常见,其次为石膏样小孢子菌、絮状表皮癣菌等。 此外如足癣抓破时,癣菌成份入血,可传至其他部位(如上肢),引起变态反应,在皮肤上呈现丘疹水泡。在病损处找不到癣菌,称癣菌疹,是一种变态反应疾病。 癣病患者可出现迟发型变态反应,用毛癣菌素(Trichphytin)作皮肤试验,出现阳性。










