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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
质型多角体病毒PCR试剂盒
- 库存:
大量
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增质型多角体病毒,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 质型多角体病毒PCR引物混合液 | 100μL(白盖) |
| 试剂四 | 质型多角体病毒PCR阳性对照(1×10E8 /μL) | 50μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 DNA。
质型多角体病毒PCR试剂盒
使用方法
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。
样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 质型多角体病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2个样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各20μL | 20μL | 20μL |
| 质型多角体病毒PCR引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR阳性对照(质型多角体病毒PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应(35个循环) | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。
PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验是稻矮缩病的病原体。病毒体为直径约 70纳米的廿面体,有 32个形态亚基,内含双 链 RNA。这些性质在植物病毒中是非常罕见的,即类似禽类的呼肠弧病毒和蚕的质型多角体病毒。寄主是稻、小麦、看麦娘等禾本科植物,媒介体为黑尾叶蝉( Delto- cephalus dorsalis)和光叶蝉( Nephotettix api- calis)等。病毒在媒介体和寄主体内都能增殖。稻矮缩病毒在日本是关东以南的稻作区主要病害之一。叶上呈不规则白色斑、分蘖多、株型矮化。在黑尾叶蝉和电光叶蝉
分为核多角体病毒属(NPV)和颗粒体病毒属(GV)两个属。其中核多角体病毒属又根据病毒粒子包膜中的粒子数目不同而划分为多粒包埋型核多角体病毒(MNPV)和单粒包埋型核多角体病毒(SNPV), 杆状病毒在其生活史中具有两种形态, 出芽病毒粒子BV(budded virus)和包埋型病毒粒子ODV(occlusion derived virus)。ODV 被包埋于由多角体蛋白质组成的包含体中, 包含体的外侧还有多角体囊膜。多角体在环境中非常稳定, 能对病毒粒子起到保护作用。当多角体被昆虫
侵染昆虫,寄生于昆虫体内,引起昆虫死亡的一类病毒。主要侵染鳞翅目昆虫,其次为膜翅目、双翅目和鞘翅目。根据有无包涵体及包涵体的形状、在细胞中的位置等,将其分为核型多角体病毒、细胞质型多角体病毒、颗粒体病毒及无包涵体病毒。已用于防治农林害虫,具有专一性强、扩散性强、毒力较大、后效较长、对人畜安全等优点,是生物防治中研究的重要内容,但也能引起许多经济昆虫(蚕、蜜蜂等)暴发病毒病,造成严重损失。










