- ￥2990
- gelatins
- 国内
- JLC-G8752
- 2025年07月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
猪鼻支原体PCR试剂盒
- 库存：
大量
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格：
50次
产品及特点：
猪鼻支原体病又称格拉斯病，是由猪鼻支原体引起猪的一种支原体性传染病。其发病特征是多发性浆膜炎和关节炎。一旦猪群中有一头猪感染猪鼻支原体, 就会在猪群中迅速传播。本产品是根据 PCR 原理开发的猪鼻支原体检测试剂盒。
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增猪鼻支原体，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供，不得用于临床诊断。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 猪鼻支原体 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 猪鼻支原体 PCR 阳性对照（1×10E8/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 DNA。
猪鼻支原体PCR试剂盒
使用方法
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 猪鼻支原体 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 猪鼻支原体PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照（猪鼻支原体PCR阳性对照1000倍稀释液） | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应（35个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95％以上是以下四种支原体：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（A.laidlawii），为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作
污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95％以上是以下四种支原体：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（A.laidlawii），为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体
,细胞营养液常常变黄,细胞生长变缓,部分细胞发生脱落等等。 如果发生了支原体污染,除非的确是极为重要的细胞,最保险的方法是将被污染细胞扔掉。 所有的对支原体污染有效的药物对细胞均有一定的毒副作用，建议不要采用。 细胞培养支原体感染 ??细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明，95％以上是以下四种支原体：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和莱氏无胆甾原体（A.laidlawii），为牛源性。以上是最常
