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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
热带利什曼原虫PCR试剂盒
- 库存:
大量
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增热带利什曼原虫,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。

规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 热带利什曼原虫 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 热带利什曼原虫 PCR 阳性对照(1×10E8 /μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品DNA。
热带利什曼原虫PCR试剂盒
使用方法:
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。
样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 热带利什曼原虫 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 热带利什曼原虫PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(热带利什曼原虫PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验虫病(schistosomiasis)、丝虫病(filariasis)、利什曼原虫病(leishmaniasis)和锥虫病(trypanosomiasis)。据估计,热带地区有3亿多人受疟疾威胁,约 1亿为现症病人,仅在非洲每年死于疟疾的儿童约100万;有76个国家和地区流行血吸虫病,5.6亿人受威胁,血吸虫病患者约1.6亿;丝虫病患者约2.5亿,其中5%有症状,而居住在受丝虫病威胁地区的居民约有9亿零5百万;全世界每年有40万利什曼原虫病的新发病人;锥虫病在南美约有1000万病人,非洲约有8000万人受威胁。此外,全球钩虫
利用水凝胶为利什曼原虫培养提供巨噬细胞生长基质的探讨动物模型的使用一直是许多科学研究的重要组成部分。动物模型能够提供“体内”数据,这比实验室条件(体外)提供的生命更真实,因为它们为研究者提供了更好地了解生物过程在原位发生的复杂性。然而,在研究中使用动物模型会带来重要的伦理问题,通常会增加成本和研究时间。二维细胞培养技术为在实验室研究人体组织培养、寄生虫和病原体提供了一种简便有效的方法。然而,这种培养的一个问题是,细胞与人工表面接触,在平板上呈平面形状,这会影响细胞生物学的重要方面。相比
第一节 杜氏利什曼原虫 利什曼原虫(Leishmania spp.)的生活史有前鞭毛体(promastigote)和无鞭毛体(amastigote)两个时期。前者寄生于节肢动物(白蛉)的消化道内,后者寄生于哺乳动物或爬行动物的细胞内,通过白蛉传播。对人和哺乳动物致病的利什曼原虫有:引起人体内脏利什曼病的为杜氏利什曼原虫[Leishmania donovani(Laveran et Mesnil,1903)],引起皮肤利什曼病的为热带利什曼原虫[L.tropica(Wright
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