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- 国产/进口
- 2025年12月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 细胞类型：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 肿瘤类型：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
10
- 英文名：
/
- 生长状态：
不规则细胞，贴壁培养
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
不规则细胞，贴壁培养
- 免疫类型：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 物种来源：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 相关疾病：
大鼠原代肾脏巨噬细胞
- 组织来源：
实验动物的正常肾脏组织
- 规格：
5*10^5
细胞详述
巨噬细胞是吞噬和消化病原体、癌细胞或细胞碎片的免疫细胞。肾脏与身体其它组织一样，从出生时就含有肾脏常驻巨噬细胞，从而保护肾脏免受感染或伤害，并通过吞噬碎片或垂死的肾脏细胞协助维持组织健康。
细胞特性：1） 组织来源于实验动物的正常肾脏组织。
2） 细胞鉴定：CD68免疫荧光染色法。
3） 经鉴定细胞纯度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5） 细胞生长方式：不规则细胞，贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
大鼠原代肾脏巨噬细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验，使动物体微倾向一侧，使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内。 6．小心拔出针头，把液体注入离心管中，250g 4℃离心10分钟，去上清，加10 ml Eagle培养基。 7．计数细胞，每只小鼠可产生20～30×105细胞，其中90％为巨噬细胞。 8．为获取3×105个帖附细胞/平方厘米，需接种2.5×106/ml。 9．为纯化培养细胞，去除其它白细胞，接种数小时后，去除培养液，用Eagle液冲洗1～2次后，再加新Eagle培养液置37℃ CO2温箱中培养。
，4℃离心10分钟，去上清，加10 ml Eagle培养基。 7．计数细胞，每只小鼠可产生20～30×105个细胞细胞，其中90%为巨噬细胞。 8．为获取3×105个帖附细胞/平方厘米，需接种2.5×106个/ml。 9．为纯化培养细胞，去除其它白细胞，接种数小时后，去除培养液，用Eagle液冲洗1-2次后，再加新Eagle培养液置37℃ CO2温箱中培养。
所示即为大鼠原代足细胞。按顺序：图1，2是培养7天传代前的图片，小球周围爬出很多细胞。图3，4是传代第二天细胞情况，过筛后仍有小的组织滤过。图5是传代7天足细胞完全分化图片。 由于本人实验刚有进展，好多图片制作不理想，后续的细胞免疫荧光坚持在做，失败过两次，出结果后再发，不过导师说了就是足细胞！ 图1 图2 图3 图4 图5
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