- ￥3990
- 帛科
- BK-P63537
- 国产
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
59
- 保质期：
有效期 12 个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
避光-20℃储存
- 规格：
50T
三日疟原虫PCR检测试剂盒(荧光PCR法)【储存条件及有效期】
1．避光-20℃储存，有效期 12 个月。
2．低温运输不能超过 4 天；开封后避光-20℃储存，对有效期没有影响。避免反复冻融，冻融 6 次不影响检测效果。
3．生产日期、有效期至：见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自动荧光PCR 检测仪。
【样本要求】
1．样本种类：鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液；培养物等样品。
2．保存条件：采集的标本应及时送检，24 小时内检测的应 4℃保存，超过 24 小时的最好-70℃保存，并避免反复冻融。
三日疟原虫PCR检测试剂盒(荧光PCR法)【检测方法】
1 ． 试剂准备（试剂准备区）
将试剂盒各组分置 4℃避光融化，充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N（N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照），根据下表配置反应体系mix，加入一适当体积离心管中，充分混匀后瞬间离心，按 20μL 分装至 PCR 反应管/板，并转移至样本处理区。
| 组分 | 体积（μL ） |
| qPCR 预混液（含酶） | 16 |
| 引物探针 | 4 |
| 总体积（反应体系 mix ） | 20 |
三日疟原虫PCR检测试剂盒(荧光PCR法)【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
3．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
4．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
5．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
6．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
【结果判定】
通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有 Ct 值，但 Tm 值跟阳性对照 Tm不一样的样品（包括对照和待测样品），归为假阳性，数据无效，不予以分析。Tm 跟阳性对照 Tm 一致的，为有效 Ct。
如果两种阴性对照的溶解曲线所得 Tm 值跟阳性对照的 Tm 值一样，说明环境或试剂可能有过去的 PCR 扩增产物污染，则此次实验无效，需要解决污染问题再进行实验。
如果两种阴性对照（样品制备阴性对照和 PCR 阴性对照）是假阳性，可以继续分析其它样品有效数据。
对定量检测，以阳性对照样品的浓度的 log 值为横轴，以有效 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的有效 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值，再换算出待测样品的 DNA 浓度。
对定性检测，则有有效 Ct 值的为阳性，无有效 Ct 值的为阴性。
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文献和实验PCR-SSCP方法分析按照我室常规进行。1.3.3 Taqman荧光探针 以发现的ALAS2基因第五外显子点突变为中心设计，序列如下：5’（荧光集团）FAM-CAAGATCATAGAGAAGAAAC-TAMRA（淬灭集团）3’，设计Taqman荧光PCR反应的上下游引物。序列如下：上游引物：5’-tcagttatgaccagtttttcaggg-3’，下游引物：5’-gaacacacggtaggtgtgatcct-3’。1.3.4 常规实时定量PCR检测ALAS2基因第五外显子基因
。因此，如何进一步提高检测方法灵敏度、简化操作程序、缩短检测时间、消除非特异因素干扰以及采用统一的、标准化的方法已成为实时荧光PCR检测试剂盒未来研究的主要方向。许多研究者趋向于将更多的精力投入实时荧光定量PCR方法的研究开发，使之进一步合理化，以增加试验的可信度；通过使其涉及的所有过程实现最终自动化，来提高临床检验结果的准确性。毫无疑问，在不久的将来，实时荧光定量PCR技术将以其显著的优势，在分子生物学、实验医学，特别是在临床医学领域中得到越来越广泛的应用。
探针荧光标记探针的最大优点在于其特异性非常强，避免了非特异性扩增造成的假阳性信号。 匹基生物开发的荧光PCR检测试剂盒主要基于Taqman技术 (TaqmanTM 5-nuclease assay)： 除常规的一对引物以外，PCR反应体系中另加有一个能与PCR产物杂交的荧光双标记探针。该探针的5端标记一个荧光基团，3标记另一个荧光基团。此时5端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3’端荧光淬灭基团（发生FRET），因此正常情况下检测不到该探针5端荧光基团发出的荧光信号。但当溶液中有模板时，模板变性后低温退火时，引物
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