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直链淀粉含量试剂盒,微板法

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  • ¥1060
  • wksubio
  • WS8050W
  • 国内
  • 2025年10月13日
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    • 英文名

      Amylose Content Test Kit

    • CAS号

      WS8050W

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
    直链淀粉含量试剂盒说明书
    (货号:WS8050W 微板法 96 样)
    一、产品简介:
    直链淀粉是 D-葡萄糖基以 a-(1,4)糖苷键连接的多糖链,其含量测定对于评价食品营养
    价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
    直链淀粉与碘形成络合物于 620nm 处读取吸光值,进而得到样本中直链淀粉的含量。
    二、测试盒组成和配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体90mL×1
    4℃保存
    使用前摇匀
    试剂二
    液体×1
    4℃保存
    临用前取出 0.2mL 的试剂二至干净瓶中或
    10mLEP 管中,并加入 3.3mL 蒸馏水混合备用。
    试剂三
    液体 2mL×1
    4℃保存
    使用前摇匀
    标准品
    液体 1mL×1
    4℃保存
    若重新做标曲,则用到该试剂。
    三、所需的仪器和用品:
    酶标仪、96 孔板、水浴锅、可调式移液器、乙醇、石*醚、蒸馏水。
    四、直链淀粉含量测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本提取:
    ① 样本烘干,磨碎并过 100 目筛待测,准确称取 0.01g 过筛样本至 2mL EP 管中,加
    1mL85%的乙醇,充分混匀,50℃水浴提取 30min(间隔 3min 晃动几下),8000rpm
    25℃离心 10min,弃上清(尽量保留沉淀),留沉淀,
    ② 向沉淀中加入 0.5mL 石*醚,混匀并振荡 5min8000rpm25℃离心 10min,弃上清
    (尽量保留沉淀),留沉淀,EP 管置于 95℃蒸发 10-20min,使石*醚挥发完全。
    ③ 向上步沉淀中(同时,准备一个空白 EP 管即空白管),加入 0.1mL 95%的乙醇分散
    样品后,再加入 0.9mL 试剂一,晃匀(使样本全部沉浸在液体中),封口,95℃煮沸
    10min(中间摇晃 1-2 次);。
    ④ 煮沸后,冷却至室温,将 EP 管中全部液体转移至 10mLEP 管中(用 1mL 蒸馏水冲洗
    EP 管,全部转至 10mLEP 管中,重复三次),再加蒸馏水准确定容至 10mL,混匀,
    静置 5min,取澄清上清液作为待检测液。
    2、上机检测:
    ① 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 620nm
    ② 制备试剂二混合液。
    ③ 在 2mL EP 管中依次加入:
    试剂(
    μL
    测定管
    空白管(仅做一次)
    样本待检液
    50
    空白管待检液
    50
    蒸馏水
    910
    910
    试剂二
    20
    20
    试剂三
    20
    20本试剂盒仅供科研使用
    2
    务必混匀,避光静置 10min 后,取出 200μL 96 孔板
    中,于 620nm 处读取吸光值 AA =A 测定-A 空白。
    【注】加完试剂二,混合液的 PH 3-5 之间,若大于 5 则继续添加试剂二,
    蒸馏水体积相应减少,保持总体积 1mL 不变。
    五、结果计算:
    1、标准曲线方程为 y = 0.8704x - 0.0016x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值A
    2、直链淀粉含量(mg/g)=[(A+0.0016) ÷0.8704×V1]÷(W×V1÷V)
    =11.489×(A+0.0016) ÷W
    V---样品提取液总体积,10mL
    V1---测定时所取样本的体积,0.05mL
    W---样本质量,g
    附:标准曲线制作过程:
    1 制备试剂一稀释液:0.9mL 试剂一+9.1mL 的蒸馏水,总体积为 10mL
    2 把标准品母液(1mg/mL 的直链淀粉标准品)用试剂一稀释液稀释成六个浓度梯度
    的标准品:00.20.40.60.81. mg/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
    3 依据测定管的加样表操作,根据结果即可制作标准曲线。

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