- ￥4490
- 帛科
- BK-P64641
- 国产
- 2025年10月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 保质期：
有效期 12 个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
避光-20℃储存
- 规格：
50T
1．样本种类：鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液；培养物等样品。
2．保存条件：采集的标本应及时送检，24 小时内检测的应 4℃保存，超过 24 小时的最好-70℃保存，并避免反复冻融。
【储存条件及有效期】
1．避光-20℃储存，有效期 12 个月。
2．低温运输不能超过 4 天；开封后避光-20℃储存，对有效期没有影响。避免反复冻融，冻融 6 次不影响检测效果。
3．生产日期、有效期至：见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自动荧光PCR 检测仪。
人鼻病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒【检测方法】
1 ． 试剂准备（试剂准备区）
将试剂盒各组分置 4℃避光融化，充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N（N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照），根据下表配置反应体系mix，加入一适当体积离心管中，充分混匀后瞬间离心，按 20μL 分装至 PCR 反应管/板，并转移至样本处理区。
| 组分 | 体积（μL ） |
| qPCR 预混液（含酶） | 16 |
| 引物探针 | 4 |
| 总体积（反应体系 mix ） | 20 |
【结果判定】
通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有 Ct 值，但 Tm 值跟阳性对照 Tm不一样的样品（包括对照和待测样品），归为假阳性，数据无效，不予以分析。Tm 跟阳性对照 Tm 一致的，为有效 Ct。
如果两种阴性对照的溶解曲线所得 Tm 值跟阳性对照的 Tm 值一样，说明环境或试剂可能有过去的 PCR 扩增产物污染，则此次实验无效，需要解决污染问题再进行实验。
如果两种阴性对照（样品制备阴性对照和 PCR 阴性对照）是假阳性，可以继续分析其它样品有效数据。
对定量检测，以阳性对照样品的浓度的 log 值为横轴，以有效 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的有效 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值，再换算出待测样品的 DNA 浓度。
对定性检测，则有有效 Ct 值的为阳性，无有效 Ct 值的为阴性。
人鼻病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
3．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
4．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
5．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
6．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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文献和实验，我们只需先将软件打开，通过主界面的 Template 按钮导入 edt 模板文件即可（图 1，绿色方框），该方法既能节省时间又可以保证实验运行正常。 图 2 双击 edt 模板文件运行实验导致 JAVA 报错实验中断 Part 2：Experiment Properties 的选择 当我们选择新建一个实验时，第一步需要完成 Experiment Properties 的设置。在这里我们为所运行的实验设置实验名，根据实验目的确定实验类型，基于所用荧光标记策略选择荧光定量方法是探针法还是染料
actin,山东大学提供样品基因。cDNA制备：测定小鼠肝脏总RNA浓度后，使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。一步法荧光定量PCR：Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit20μl反应体系包括：10μl 2×One-step SYBR premixture，7.2μl RNA Free Water，0.4μl Primer F，0.4μl Primer R，1μl cDNA，1μl One-step
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