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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
1.样本种类:鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液;培养物等样品。
2.保存条件:采集的标本应及时送检,24 小时内检测的应 4℃保存,超过 24 小时的最好-70℃保存,并避免反复冻融。
【储存条件及有效期】
1.避光-20℃储存,有效期 12 个月。
2.低温运输不能超过 4 天;开封后避光-20℃储存,对有效期没有影响。避免反复冻融,冻融 6 次不影响检测效果。
3.生产日期、有效期至:见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自动荧光PCR 检测仪。
牛呼肠孤病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒【检测方法】
1 . 试剂准备(试剂准备区)
将试剂盒各组分置 4℃避光融化,充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N(N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照),根据下表配置反应体系mix,加入一适当体积离心管中,充分混匀后瞬间离心,按 20μL 分装至 PCR 反应管/板,并转移至样本处理区。
| 组分 | 体积(μL ) |
| qPCR 预混液(含酶) | 16 |
| 引物探针 | 4 |
| 总体积(反应体系 mix ) | 20 |
【结果判定】
通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有 Ct 值,但 Tm 值跟阳性对照 Tm不一样的样品(包括对照和待测样品),归为假阳性,数据无效,不予以分析。Tm 跟阳性对照 Tm 一致的,为有效 Ct。
如果两种阴性对照的溶解曲线所得 Tm 值跟阳性对照的 Tm 值一样,说明环境或试剂可能有过去的 PCR 扩增产物污染,则此次实验无效,需要解决污染问题再进行实验。
如果两种阴性对照(样品制备阴性对照和 PCR 阴性对照)是假阳性,可以继续分析其它样品有效数据。
对定量检测,以阳性对照样品的浓度的 log 值为横轴,以有效 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的有效 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值,再换算出待测样品的 DNA 浓度。
对定性检测,则有有效 Ct 值的为阳性,无有效 Ct 值的为阴性。
牛呼肠孤病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
3.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
4.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
5.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
6.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
| 猫疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 突触囊泡蛋白ⅦELISA试剂盒 SYT7免费代测试剂 |
| 志贺氏菌PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 角蛋白15ELISA试剂盒 KRT15免费代测试剂 |
| 血红链球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 2 |
| 猫传染性腹膜炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 角化粒ELISA试剂盒 |
| 双歧杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 精胺合成酶ELISA试剂盒 |
| 海金沙探针法PCR鉴定试剂盒 | 卷曲同源物7ELISA试剂盒 |
| 龟分枝杆菌PCR检测试剂盒 | 抗β2糖蛋白IELISA试剂盒 |
| 兔痘病毒PCR检测试剂盒 | 抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体ELISA试剂盒 |
| 头状葡萄球菌PCR检测试剂盒 | 抗甲型肝炎病毒IgM抗体ELISA试剂盒 |
| 瓜纳瑞托病毒PCR检测试剂盒 | 抗绒毛膜促性腺激素抗体ELISA试剂盒 |
| 天花病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人落叶型天疱疮抗体(PF)ELISA Kit |
| 副溶血性弧菌PCR检测试剂盒 | 大鼠高密度脂蛋白(HDL)检测试剂盒elisa |
| 甲型流感(禽流感)病毒H2N2亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA检测试剂盒 |
| 登革热病毒Ⅲ、Ⅳ型分型PCR检测试剂盒 | 人军团菌抗体IgM(LP Ab-IgM)ELISA试剂盒 |
| 罗斯河病毒PCR检测试剂盒(荧光PCR法) | 人抗转谷氨酰胺酶抗体(IgG)ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验实时荧光定量 PCR 技术(Quantitative Real-time PCR,简称 qPCR)是在 PCR 扩增过程中,通过实时监测荧光信号的变化,达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断,动物疾病监测,食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延,qPCR 技术更是因其检测通量高,速度快,操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果,我们需要注意哪些方面呢?其实决定一次实验成功
或者 Ct 值偏大的样本孔,到底是真的没有要检测的对象,还是扩增有问题,亦或是提取中的问题?为了发现这种假阴性的发生,合理的阳性对照可以监控实验的不同步骤: 扩增对照 Amplification Control 可使用含有扩增片段的质粒、假病毒或者基因组 DNA/cDNA 作为扩增阳性对照,监控荧光定量 PCR 的体系是否正常,包括酶、引物、探针等。如果检测中包含多个目标片段,可以将这些目标片段都克隆到同一个质粒中,方便制备和使用。当扩增对照没有扩增,或者 Ct 值大于预期,则说明定量 PCR
实验室检测和快速诊断的标准如《GB/T 19438.1-2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.3-2004 H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》等。以上实时荧光定量PCR技术在禽流感检测方面的国家标准是该技术在当前的人感染猪流感诊断中应用的基础和前提。实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用要求实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative
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