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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
1.避光-20℃储存,有效期 12 个月。
2.低温运输不能超过 4 天;开封后避光-20℃储存,对有效期没有影响。避免反复冻融,冻融 6 次不影响检测效果。
3.生产日期、有效期至:见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自动荧光PCR 检测仪。
【样本要求】
1.样本种类:鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液;培养物等样品。
2.保存条件:采集的标本应及时送检,24 小时内检测的应 4℃保存,超过 24 小时的最好-70℃保存,并避免反复冻融。
白垩立克次氏体探针法荧光定量PCR试剂盒【检测方法】
1 . 试剂准备(试剂准备区)
将试剂盒各组分置 4℃避光融化,充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N(N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照),根据下表配置反应体系mix,加入一适当体积离心管中,充分混匀后瞬间离心,按 20μL 分装至 PCR 反应管/板,并转移至样本处理区。
| 组分 | 体积(μL ) |
| qPCR 预混液(含酶) | 16 |
| 引物探针 | 4 |
| 总体积(反应体系 mix ) | 20 |
【结果判定】
通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有 Ct 值,但 Tm 值跟阳性对照 Tm不一样的样品(包括对照和待测样品),归为假阳性,数据无效,不予以分析。Tm 跟阳性对照 Tm 一致的,为有效 Ct。
如果两种阴性对照的溶解曲线所得 Tm 值跟阳性对照的 Tm 值一样,说明环境或试剂可能有过去的 PCR 扩增产物污染,则此次实验无效,需要解决污染问题再进行实验。
如果两种阴性对照(样品制备阴性对照和 PCR 阴性对照)是假阳性,可以继续分析其它样品有效数据。
对定量检测,以阳性对照样品的浓度的 log 值为横轴,以有效 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的有效 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值,再换算出待测样品的 DNA 浓度。
对定性检测,则有有效 Ct 值的为阳性,无有效 Ct 值的为阴性。
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1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
3.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
4.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
5.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
6.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验立克次氏体 立克次氏体(Rickettsia)为革兰氏阴性菌,是一类专性寄生于真核细胞内的G-原核生物。是介于细菌与病毒之间,而接近于细菌的一类原核生物医学教育网搜集|整理。一般呈球状或杆状,是专性细胞内寄生物,主要寄生于节肢动物,有的会通过蚤、虱、蜱、螨传入人体、如斑疹伤寒、战壕热。
专性细胞内寄生、行二分裂繁殖的原核微生物类群。英国医生立克次氏(H.T.Ricketts)研究斑疹伤寒时发现,并于1919年命名。大小介于细菌与病毒之间,除Q热立克次氏体外,均不能通过细菌滤器。细胞球状、杆状或多形态。球状体直径0.2~0.5微米,杆状体大小0.3~0.6×0.8~20微米,有些种在细胞分裂前可长达4微米。形态特征对种的鉴定有重要意义。革兰氏染色阴性。在光学显微镜下可见,存在于宿主的胞质或细胞核中。细胞结构与细菌相似,细胞壁中含有胞壁酸,二氨基庚二酸等与细菌
1、简介立克次氏体(Rickettsia)是介于最小细菌和病毒之间的一类独特的微生物,它们的特点之一是多形性,可以是球杆状或杆状,还有时出现长丝状体。立克次体长0.3微米~0.8微米,宽0.3微米~0.5微米,丝状体长可达2微米。一般可在光学显微镜下观察到。2、习性与繁殖立克次氏体是一类严格的活细胞内寄生的原核细胞型微生物。它的许多生物学性状接近细菌,比如:有与细菌相似的细胞壁结构,也是一个分成两个,两个分成4个的二分裂方式繁殖,它有比较复杂的酶系统,对多种抗生素敏感,等等。它能引起人类患病
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