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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 普通变形杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | BKP7110 |
普通变形杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
| 三棱探针法PCR鉴定试剂盒 | 腺苷酸激酶3ELISA试剂盒 AK3免费代测试剂 |
| 塞皮克病毒PCR检测试剂盒供应 | 环氧化合物水解酶3ELISA试剂盒 EPHX3免费代测试剂 |
| 口腔支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 生长激素促分泌素受体ELISA试剂盒 |
| 鳃霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 肌蛋白ELISA试剂盒 |
| 人腺病毒D60型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 肌特异性烯醇化酶ELISA试剂盒 |
| 甲型流感(禽流感)病毒N3亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 基质抗原2ELISA试剂盒 |
| 酵母菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 脊髓灰质炎病毒ELISA试剂盒 |
| 沙眼衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 甲肟前列腺素D2ELISA试剂盒 |
| 沙门氏菌(SPP)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法) | 间隙连接蛋白β1ELISA试剂盒 |
| 间日疟PCR检测试剂盒 | 窖蛋白3ELISA试剂盒 |
| 溶组织梭状杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)试剂盒 ELISA |
| 鸡滑液囊支原体(MS)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法) | 小鼠血管紧张素原(aGT)elisa试剂盒 |
| 人腺病毒D85型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 |
| 布氏旋毛虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人黑色素ELISA试剂盒 |
| 犬支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)试剂盒ELISA |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
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文献和实验(请注意,该图显示的不是普通的Taqman探针法,而是Taqman MGB探针法)Taqman探针检测的是积累荧光。常用的荧光基团有FAM,TET,VIC,HEX等等。当探针完整的时候,由于3′端的荧光淬灭基团在吸收5′端报告基团所发射的荧光能量,本身会发射波长不同的荧光而导致本底高,因此TaqMan探针近来又有新的发展——TaqMan MGB探针。MGB探针的淬灭基团采用非荧光淬灭基团(Non-Fluorescent Quencher),本身不产生荧光,可以大大降低本底信号的强度。同时探针
— real-time PCR,针对miRNA的real-time PCR与常规的real-time 有所不同。 目前有的公司提供的是探针法试剂,有的是SYBR Green法试剂,因探针法试剂成本较高,丁香通在此挑选出SYBR Green法的代表作 — QIAGEN公司的完整的一套miRNA定量试剂miScrip system来介绍,这次比起其他进口品牌同系列的产品,QIAGEN价格倒是不贵。 第一步是miRNA的提取,核酸提取无疑是QIAGEN公司的绝活,对于miRNA这样的小分
标记(生物素、荧光、地高辛和Eu3+等)、引入与蛋白质结合的DNA序列、引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入启动子序列等。 2 特定PCR的引物设计 在尽量遵循引物设计基本原则的同时,根据不同的实验目的,需要注意一些相应的事项,总结如下: 01 荧光定量PCR 荧光定量PCR有染料法和探针法两种。染料法只需要设计引物,而探针法除设计引物之外还得设计一条探针。 引物设计要尽量满足以下要求: 确保模板是cDNA
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