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果糖含量试剂盒,微板法

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  • ￥600
  • wksubio
  • WS5050W
  • 国内
  • 2025年12月14日
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    • 英文名：

      Fructose Content Kit

    • CAS号：

      WS5050W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
     
    果糖（fructose）含量（间苯二酚法）试剂盒说明书
    （货号：WS5050W 微板法 96 样）
    一、产品简介：
    果糖是一种最为常见的己酮糖，是葡萄糖的同分异构体，以游离状态大量存在于水果的
    浆汁和蜂蜜中。本试剂盒检测果糖，是通过果糖与间苯二酚反应，生成有色物质，在 480nm
    下有特征吸收峰，进而求得待检测样本果糖含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    液体 30 mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    液体 10 mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1 支
    4℃保存
    临用前加1mL蒸馏水溶解，
    即 1mg/mL 果糖溶液
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、水浴锅、可调式移液器、研钵、乙醇、蒸馏水。
    四、果糖含量的测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    建议：可取两个样本做适当梯度的稀释（如 2-5 倍），确定适合本次实验的稀释倍数 D。
    1、样本制备
    ① 组织样本：
    称取 0.1g 样本（若是干样，如烘干烟叶等可取 0.05g；若是水分充足的样本可取 0.2g），
    先加入 0.8mL 的 80%乙醇（自备：取 80mL 乙醇溶于 20mL 蒸馏水中），冰浴匀浆，倒入
    有盖离心管中，再用 80%乙醇冲洗研钵并转移至同一 EP 管中，使 EP 管中粗提液终体积
    定容为 1.5mL（若用自动研磨机可直接加入 1.5mL 的 80%乙醇研磨）；置 50℃水浴 20min
    （封口膜缠紧，防止液体散失，且间隔 2min 振荡混匀一次），冷却后（若有损失，可加
    80%乙醇补齐至 1.5mL），12000rpm，室温离心 10min，取上清液备用。
    ② 液体样本：
    澄清的液体样本直接检测，若浑浊则需 12000rpm，室温离心 10min，取上清液备用。
    2、 上机检测
    ① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 480nm。
    ② 在 EP 管中依次加入下列试剂：
    试剂（μL）
    测定管
    标准管
    （仅做一次）
    空白管
    （仅做一次）
    样本
    30
    标准品
    30
    蒸馏水
    30
    试剂一
    210
    210
    210
    试剂二
    60
    60
    60
    混匀，95℃水浴反应 30min（可用封口膜缠紧，以防止水
    分散失），冷却后取 200μL 至 96 孔板中，在 480nm 分别
    读取吸光值 A，△A=A 测定-A 空白。本试剂盒仅供科研使用
    2
    【注】：如果ΔA 大于 1，需要将样本用蒸馏水稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数 D。
    五、结果计算：
    1、按照重量计算：
    果糖含量（mg/g 重量）=(C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷(W×V1÷V)×D
    =1.5×△A÷(A 标准-A 空白)÷W×D
    2、按液体体积计算：
    果糖含量（mg /mL 液体）= (C 标准×V1)×△A÷(A 标准-A 空白)÷V1×D
    =△A÷(A 标准-A 空白)×D
    C 标准---果糖标准品浓度，1mg/mL；
    V---加入提取液体积，1.5mL；
    V1---加入样本积，0.03mL；
    W---样本鲜重，g；
    D---稀释倍数。

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