- ￥4490
- 帛科
- BKP6867
- 国产
- 2025年12月31日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
53
- 保质期：
有效期 12 个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
避光-20℃储存
- 规格：
50T
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 产酸克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | BKP6867 |
产酸克雷伯菌探针法荧光定量PCR试剂盒【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有 N 个样品，最好设置 N+2 个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液（1×10E4 拷贝/μL）再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取：核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
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本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，引物经过优化，灵敏性高，分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标高度保守区设计，不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应，本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应，既可用于定性，也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
、凸起、半透明或灰白色菌落。淋球菌具有氧化酶和触酶，分解葡萄糖产酸，不分解蔗糖、麦芽糖和乳糖。细菌培养是检验诊断淋球菌感染的“金标准”，目前仍为诊断淋病最可靠的方法。但淋球菌对外环境抵抗力极弱，对冷、热、干燥和化学消毒剂大都敏感；且临床标本的采集、输送、培养接种方式等都可能影响检验结果的准确性。 3.2.3 快速检测法 采用淋病检测试纸进行检测，与比色卡阳性颜色相比，试纸变色一致则确认为阳性。 3.2.4 荧光定量PCR法 具体操作步骤严格按照PCR试剂盒说明书进行操作。最后
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