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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
鸡包涵体肝炎病毒病毒探针法荧光定量PCR试剂盒【储存条件及有效期】
1.避光-20℃储存,有效期 12 个月。
2.低温运输不能超过 4 天;开封后避光-20℃储存,对有效期没有影响。避免反复冻融,冻融 6 次不影响检测效果。
3.生产日期、有效期至:见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自动荧光PCR 检测仪。
【样本要求】
1.样本种类:鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液;培养物等样品。
2.保存条件:采集的标本应及时送检,24 小时内检测的应 4℃保存,超过 24 小时的最好-70℃保存,并避免反复冻融。
鸡包涵体肝炎病毒病毒探针法荧光定量PCR试剂盒【检测方法】
1 . 试剂准备(试剂准备区)
将试剂盒各组分置 4℃避光融化,充分混匀后瞬间离心。计算试剂使用份数 N(N=样本数+1 管阳性对照+1 管阴性对照),根据下表配置反应体系mix,加入一适当体积离心管中,充分混匀后瞬间离心,按 20μL 分装至 PCR 反应管/板,并转移至样本处理区。
| 组分 | 体积(μL ) |
| qPCR 预混液(含酶) | 16 |
| 引物探针 | 4 |
| 总体积(反应体系 mix ) | 20 |
鸡包涵体肝炎病毒病毒探针法荧光定量PCR试剂盒【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
3.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
4.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
5.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
6.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
【结果判定】
通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有 Ct 值,但 Tm 值跟阳性对照 Tm不一样的样品(包括对照和待测样品),归为假阳性,数据无效,不予以分析。Tm 跟阳性对照 Tm 一致的,为有效 Ct。
如果两种阴性对照的溶解曲线所得 Tm 值跟阳性对照的 Tm 值一样,说明环境或试剂可能有过去的 PCR 扩增产物污染,则此次实验无效,需要解决污染问题再进行实验。
如果两种阴性对照(样品制备阴性对照和 PCR 阴性对照)是假阳性,可以继续分析其它样品有效数据。
对定量检测,以阳性对照样品的浓度的 log 值为横轴,以有效 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的有效 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值,再换算出待测样品的 DNA 浓度。
对定性检测,则有有效 Ct 值的为阳性,无有效 Ct 值的为阴性。
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文献和实验相关实验
无论是对遗传病(如地中海贫血和血友病)、传染病(如肝炎和艾滋病)或肿瘤进行基因诊断,还是研究药物对基因表达水平的影响,或者监控药物和疗法的治疗效果,定量PCR技术都可以发挥很大作用。定量PCR技术的最新进展是实时荧光定量。该技术借助于荧光信号来检测PCR产物,一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定CT值,从而根据CT值确定起始DNA拷贝数,做到了真正意义
等症状。5. 病理小鼠感染LCMV后,大脑型LCM在胸腔、腹腔内可见浆液性渗出物, 软脑膜和脉络丛有单核细胞浸润,于6~9天达到高峰,并密集于珠网膜池和各脑室的脉络丛中。电镜下可见特征性的脉络丛上皮细胞胞浆内包涵体。内脏型LCM在感染后6天肝脏内可见小叶性肝炎,散见嗜酸性细胞坏死区。迟发性LCM可见淋巴细胞、单核细胞、浆细胞浸润肾脏的肾小球和脑脉络丛等组织。6. 诊断LCM的诊断可通过病毒的分离与鉴定及血清学试验来进行。 取病鼠病理组织制成冰冻切片,采用免疫荧光试验确定细胞浆内特异性的病毒抗原包涵体
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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