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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 苛养木杆菌PCR检测试剂盒 | 50T | BKP4546 |
苛养木杆菌PCR检测试剂盒【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
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本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
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文献和实验性传播性疾病(sexually transmitted diseases,STD)的检测
淋菌性 尿 道 炎 的 指 征 。 有 尿 道 炎 症 状而衣原体培 养阴性应注意支原体的感染。 (二)检查衣原体的试剂盒 目 前 有 两 种 商 品 性 试 剂 盒 1.Chlamydiazyme试 验 :此 诊 断试剂 盒的敏 感 性 为 81%, 特 异 性为98% 。 2.Micro Trak试验:此 法 是用 荧 光 素 标 记 的 单 克 隆 抗体 鉴 定 衣 原 体 。 (三)细 胞 学 检 查 法
,我专门购买了大肠杆菌基因组提取试剂盒,花了500个银子,实际上根本不必买,在取目的基因时只要用适量的菌液就好。(当然,因实验而异,对基因组纯度要求高的实验还是需要提取试剂盒) 4:回收高保真酶扩增的PCR产物,NdeⅠ,SalⅠ双酶切,上同样用NdeⅠ,SalⅠ双酶切的PET28载体(需要SAP处理),转化BL21(DE3)表达菌株。由于刚刚购买的NdeⅠ,SalⅠ活性很低,因此在表达载体构建时消耗了大量时间,当确认感受态和转化方法没有问题,转化结果表现为:(1)表达载体没有经过SAP处理时,平板
)将Hp的SDS-PAGE表型分型,综合112株的共同条带特征,可将Hp分为Ⅰ~Ⅳ型,而其中Ⅳ型又 分为Ⅳ1~Ⅳ5五个亚型。我们认为这种分型方法有利于Hp的致病性与菌苗的研究。 贾继辉等(1994)发现,Hp的L型与其它细菌的L型一样,形态不均一,呈多形性。用HindⅢ酶切分析,显示Hp-L型和细菌型的酶谱基本相同,南方医院(1996)发现Hp的变异体在体外可长期传代,而冷冻保存后则难以复苏,用特定的无血培 养基可以促进形态复原。由于该球形体有完整的胞壁和鞭毛,故不属于严格意义上的L型菌
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