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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 保质期:
有效期 12 个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
避光-20℃储存
- 规格:
50T
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,引物经过优化,灵敏性高,分析灵敏度可以达到 100 拷贝/反应,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标高度保守区设计,不会跟其他生物的 DNA发生交叉反应,本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应,既可用于定性,也可用于定量。用于定量时线性范围至少5个数量级。
商品属性:
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 抗亚碲酸盐大肠杆菌157:7型PCR检测试剂盒 | 50T | BKP4438 |
| 名 称 | 规 格 |
| 2×SYBR qPCR MasterMix | 0.5mL×1管 |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL×1 管 |
| 超纯水 | 1mL×1 管 |
| 染料法qPCR 引物混合液 | 100μL×1 管 |
| qPCR 阳性对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL ×1 管 |
抗亚碲酸盐大肠杆菌157:7型PCR检测试剂盒【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以 10E1-10E6 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 4 号管中加入 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E4 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有 N 个样品,最好设置 N+2 个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 第 6 步所得的第 4 号稀释液(1×10E4 拷贝/μL)再加上一定量的水使总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。
2.2核酸提取:核酸提取可以采用公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
| 查菲艾利希体(查菲埃立克体)染料法荧光定量PCR试剂盒 | 登革热抗体IgMELISA试剂盒 DF-Ab IgM免费代测试剂 |
| 草乌染料法PCR鉴定试剂盒 | 补体蛋白9ELISA试剂盒 C9免费代测试剂 |
| 乙型肝炎病毒cccDNA PCR测定试剂盒 | CopineⅡ蛋白ELISA试剂盒 |
| 耶尔森菌通用PCR检测试剂盒 | 布鲁东氏酪氨酸激酶ELISA试剂盒 |
| 鲁氏不动杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3ELISA试剂盒 |
| 球孢子菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 单链选择性单功能尿嘧啶DNA糖基化酶1ELISA试剂盒 |
| 犬布鲁氏杆菌PCR检测试剂盒 | 蛋白二硫化物异构酶前体ELISA试剂盒 |
| 流行性肋腺炎病毒PCR检测试剂盒 | 蛋白酶3抗体ELISA试剂盒 |
| 流产嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 电子转移黄素蛋白β肽ELISA试剂盒 |
| 禽网状内皮组织增殖病病毒PCR检测试剂盒供应 | 多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶ELISA试剂盒 |
| 肯塔基沙门氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人谷胱甘肽还原酶(GR)检测试剂盒elisa |
| 秦艽染料法PCR鉴定试剂盒 | 人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型(AgtrⅠa)试剂盒ELISA |
| 致泻性大肠杆菌(致泻性大肠埃希氏菌)通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人非小细胞肺癌相关抗原211(CA211)ELISA试剂盒 |
| 同猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR检测试剂盒 | 人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)试剂盒 ELISA |
| 玉米GA PCR检测试剂盒 | 人半乳糖(Galactose)ELISA试剂盒 |
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文献和实验存在问题。Gehring将单抗结合在磁珠上,自血液中吸附伤寒杆菌,再以免疫电化学发光法(ECM)检测,可以检出8×103/ml菌体,也有直接检出伤寒杆菌H或O抗原的报导。针对结合分支杆菌的表面抗原或脂阿拉伯聚糖(GAM)制成单抗,用ELISA或斑点EIA法可直接检测标本中的TB抗原。Brenda等报告用ELISA法可直接检测粪便中O157型大肠杆菌抗原,应用O157的多克隆抗体包被酶标板,加入适当稀释与处理的粪便标本后,再与过氧化物酶标记的抗O157抗体结合,加底物呈色。经与细菌培养法平行检查185份标本,阴性者9份
,我专门购买了大肠杆菌基因组提取试剂盒,花了500个银子,实际上根本不必买,在取目的基因时只要用适量的菌液就好。(当然,因实验而异,对基因组纯度要求高的实验还是需要提取试剂盒) 4:回收高保真酶扩增的PCR产物,NdeⅠ,SalⅠ双酶切,上同样用NdeⅠ,SalⅠ双酶切的PET28载体(需要SAP处理),转化BL21(DE3)表达菌株。由于刚刚购买的NdeⅠ,SalⅠ活性很低,因此在表达载体构建时消耗了大量时间,当确认感受态和转化方法没有问题,转化结果表现为:(1)表达载体没有经过SAP处理时,平板
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
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