质谱服务-蛋白质相互作用分析技术服务

 

质谱服务-蛋白质相互作用分析技术服务-详情

蛋白相互作用是指两个及以上的蛋白质分子结合形成蛋白质复合tǐ的一个过程。一般情况下蛋白质很难单独发挥作用，都是由多个蛋白质分子的相互协调共同实现复杂的细胞功能。因此专注于蛋白相互作用的研究更加利于探索疾病的发生发展、找寻特定的疾病预测治疗方法，并且在新药研发的研究方面提供新的思路。蛋白质互作分析的方法较多，百泰派克提供蛋白质互作分析服务，及后续基于液质联用技术（LC-MS/MS）对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析服务。详情参见：

蛋白质相互作用质谱分析

免疫共沉淀法（CO-IP）结合质谱联用的蛋白互作分析

GST融合蛋白Pull-down技术结合质谱联用的蛋白互作分析

SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析

1，免疫共沉淀法（CO-IP）蛋白质相互作用分析

免疫共沉淀法（CO-IP）利用抗原抗tǐ之间的特异性来检测蛋白质之间的生理性相互作用的一种方式。shǒu先在实验中为了zuì大限度的保留细胞中蛋白的相互作用，会使用非离子变性剂来裂解细胞。当细胞裂解时，细胞内的蛋白相互作用被保存下来，在其中加入相应的抗tǐ，使抗tǐ与细胞中的特异蛋白质结合，再加入蛋白A/G形成抗tǐ蛋白复合物，进行离心、分离，使抗tǐ蛋白复合物沉淀，弃去上清液，zuì后用质谱技术鉴定沉淀下来的蛋白质，进而证明两者间的相互作用。仅适用于分析稳定或者强烈的蛋白质间相互作用；通常用来鉴定某个目标蛋白质与另一个蛋白质之间相互作用或者被用来寻找与某个目标蛋白质存在相互作用的未知蛋白质。

百泰派克生物科技针对样品蛋白的提取、表达和纯化的优化方案可确保获得高质量的诱饵和猎物蛋白，为客户提供优质的Co-IP蛋白互作分析服务及对免疫共沉淀CO-IP获取的蛋白进行蛋白质谱分析。

百泰派克蛋白质相互作用分析

• 优点：可分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合物；

• 缺点：灵敏度较低；不能进行亲和力低和瞬间的蛋白质相互作用分析检测。

2，GST融合蛋白pull-down沉降技术的蛋白质相互作用分析

GST融合蛋白pull-down沉降技术，利用基因重组将带有GST标签的载tǐ插入到目标蛋白A上，谷胱甘肽包裹的磁珠与目标融合蛋白结合，加入细胞裂解液后，具有相互作用的蛋白被融合蛋白吸附，加入过量的谷胱甘肽进行洗脱，zuì后用MS技术分析。这种方法主要是研究tǐ外强烈或者稳定的蛋白质间相互作用；可以鉴定两种已知的感兴趣蛋白质可能存在的直接相互作用；寻找可能与目标蛋白存在相互作用关系的未知蛋白。

作为技术依托型的科研技术服务公司，百泰派克生物科技在蛋白互作分析服务及基于质谱的互作蛋白质质谱鉴定分析方面拥有多年经验。百泰派克提供基于GST pull-down蛋白互作分析服务，及Pull-down靶蛋白质谱鉴定服务。我们以严格的质量控制和较短的检测周期为特色，百泰派克向客户提供可定制的一站式服务，涵盖您项目中从基因合成到数据报告的每个步骤。

• 优点：可排除细胞内其他情况的干扰；可以直接检测蛋白质之间是否有相互作用；方法简单，操作方便。

• 缺点：在细胞外进行，不能准确的反应细胞内的蛋白质相互作用关系。

[3，SILAC与免疫共沉淀质谱联用的蛋白互作分析

](/coip-silac.html)

利用SILAC方法分别标记实验组和对照组细胞后进行Co-IP实验，依靠抗原与抗tǐ之间的专一性反应分离得到免疫复合物；再通过LC-MS/MS来定性/定量检测免疫复合物中的蛋白；当实验组与对照组中某个蛋白质的含量达到统计学差异时，判定这个蛋白质与研究的蛋白具有相互作用，可jí大降低蛋白质互作假阳性结果可能性。SILAC技术和Co-IP-MS技术结合可用于高通量定量分析在特定情况下蛋白的互作蛋白网。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台，Orbitrap Fusion质谱平台，Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供SILAC与免疫共沉淀质谱联用的蛋白互作分析服务技术包裹（SILAC-based CoIP-MS），您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的细胞寄给我们，我们会负责项目后续所有事宜，包括细胞培养、细胞标记、蛋白提取、抗tǐIP、效率检测、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。

 

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服务项目

蛋白分析

蛋白鉴定	分子量测定	肽质量指纹图谱分析
基于埃德曼降解的蛋白质N端测序	Pull-down靶蛋白质谱鉴定	Shotgun鸟枪法蛋白质鉴定
蛋白测序	蛋白质N/C端测序	蛋白全序列测定
标记转移法蛋白相互作用分析	单克隆抗体从头测序	蛋白从头测序和突变分析
SILAC与免疫共沉淀质谱联用	蛋白质相互作用分析	蛋白质相互作用质谱分析
GST pull-down	蛋白质质谱鉴定	交联法蛋白相互作用分析
蛋白质结构鉴定	抗体测序	蛋白质圆二色谱分析
膜蛋白鉴定服务	序列分析	多肽测序
多肽从头测序	CO-IP免疫共沉淀法	Far-Western Blot分析
蛋白质一级结构的测定

蛋白质组学

定量蛋白质组学	Label Free	iTRAQ, TMT, SILAC
半定量蛋白质组学	2D-DIGE定量蛋白质组学	SWATH定量蛋白组学
MRM/PRM定量蛋白组学	4D蛋白质组学	多肽组学
多肽质谱鉴定	多肽生物标志物鉴定	翻译后修饰蛋白组学
糖基化定量蛋白组学研究	乙酰化定量蛋白组研究	泛素化定量蛋白组学研究
组蛋白翻译后修饰分析	酰化定量蛋白质组研究	甲基化定量蛋白组学研究
蛋白质SUMO化鉴定	基于Top down自上而下	法的PTMs表征
糖蛋白组学	绝对定量分析（AQUA）	肽纯度分析
DIA定量蛋白质组学	靶向蛋白质组学	S-亚硝基化分析
基于高精度质谱的免疫	蛋白二硫键鉴定和定量分析	磷酸化定量蛋白组学研究
多肽组学分析及新抗原发现

代谢组学

非靶向代谢组学	靶向代谢组学	氨基酸及其衍生物
肉碱和酰基肉碱类	植物激素	胆汁酸
动物激素	脂肪酸及脂肪酸代谢	ATP代谢相关物质分析
白藜芦醇	木酚素	多酚
生物胺	有机酸	类胡萝卜素
核苷酸及相关物质分析	短链脂肪酸	脂质代谢组学
离子组学	未知代谢物鉴定	源性代谢物分析
糖类及糖代谢	维生素与辅酶	NAD代谢相关物质分析
氧化型胆固醇	脂质组学MALDI成像服务	代谢通量分析
黄酮

多组学整合分析

脂质组学+蛋白质组学	转录组学+代谢组学	转录组学+蛋白质组学
蛋白质组学+代谢组学	翻译后修饰蛋白质组+代谢组	转录组学+脂质组学

生物药物表征

非变性质谱分析（Native MS）	抗体偶联药物（ADCs）分析	蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱）
生物药二硫键/游离半胱氨酸检测	肽段覆盖率/肽谱图分析	SDS-PAGE蛋白质纯度分析
高分辨质谱分子量鉴定	抗体C端K缺失比例分析	MALDI TOF分子量分析
生物制药N/C端测序	生物药糖谱检测	蛋白质肽谱图测定
氢氘交换质谱HDX MS	蛋白质等电点测定	宿主蛋白残留(HCP)分析
生物药糖基化位点检测	生物制药N端测序	生物药氨基酸组成分析

单细胞分析

单细胞质谱流式技术

单细胞测序

检测平台

基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台：该平台配备了Agilent 2100 生物分析仪、 ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统，为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航，包括样品制备、分离纯化、分子量测量、杂质表征表达研究等；

基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台：该平台配备了超高效液相色谱质谱联用，Orbitrap Fusion Lumos Tribri，Thermo Scientific Exploris以及氢氘交换质谱仪配合机械臂为蛋白质组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段，包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究；

生物药物表征平台： 该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪，氢氘交换质谱仪配备机械臂，为生物药物表征提供了全面的分析手段，包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究；

基于10x Genomics的单细胞分析平台：该平台能够完成基于10x Genomics单细胞分析平台的检测流程，包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序；

基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台：采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪（Mass Cytometry System for Single Cell Analysis）用于单细胞质谱分析，该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析；

基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台：基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台，能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究；

生信云平台：基于生物信息分析方法的生信云平台，能够完成一整套的生物信息学解决方案，包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。

 

特色项目

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一、蛋白测序

蛋白测序服务两种主要分析方法

E蛋白测序服务两种主要分析方法：埃德曼降解（Harvey和Ferrier，2011； Bauer等，1997）和质谱分析（MS）（Sahukar等，2016）。蛋白质测序和鉴定常用质谱法，埃德曼降解法是表征蛋白质N端重要的方法之一。

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

蛋白测序服务流程

蛋白测序服务优势

1 .采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

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二、蛋白质组学

蛋白质组的研究不仅能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析，我们可以找到某些“疾病特异性的蛋白质分子”，它们可成为新药物设计的分子靶点，或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。确实，那些世界范围内销路好的药物本身是蛋白质或其作用靶点为某种蛋白质分子。因此，蛋白质组学研究不仅是探索生命奥秘的必须工作，也能为人类健康事业带来巨大的利益。蛋白质组学的研究是生命科学进入后基因时代的特征。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

不同技术的比较

蛋白质组学服务	特点	技术要点
Label-free	非标蛋白质组学	无需对样品标记处理； 操作简单； 可大规模分析蛋白质鉴定样品，对样品数量无限制。
iTRAQ/TMT	体外标记定量蛋白质组学	可同时定量分析 2-10 个样品； 体外标记，不受样品类型限制； 可鉴定多达6000个蛋白； 实验稳定度和重复度较高。
SILAC/二甲基	体内标记定量蛋白质组学	可对比23 个样品； 体内标记，标记稳定，组间误差小； 需要的样本量较小，仅需几十微克的蛋白。
SWATH	DIA 全景蛋白质组学	全景式、高通量、非质谱依赖的数据采集手段； 数据采集精准高效，线性范围； 检测蛋白丰度跨越 4个数量级； 可分析多达 2000 个蛋白质。
MRM	绝对定量蛋白质组学	基于已知质谱信息来对目标分子进行分析的手段； 检测精准高效，可进行绝对定量分析； 实验结果重现性好，准确度高； 可精准鉴定低丰度蛋白。

蛋白质组学服务优势

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

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三、单细胞质谱流式技术分析

单细胞质谱流式（Mass Cytometry）技术利用质谱技术对单细胞进行多参数检测，既有传统流式细胞术能够高速分析的特点，又兼并了质谱检测的高分辨能力。能够指定检测蛋白，避免漏掉丰度很低但又很重要的蛋白，且质谱流式技术通量相当高，可以实现大量细胞的检测。

百泰派克生物科技单细胞质谱流式分析方案

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

单细胞质谱流式服务优势

①技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

②分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

③应用前景大

a)流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

b)将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

c)可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

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四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现分析策略

结果交付

1.所有鉴定的免疫多肽列表，新抗原肽以及肿瘤相关抗原肽列表；
2. 免疫多肽组数据质量分析，如研究案例中的数据报告。

 

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五、生物药物表征

生物制药是通过现代医学研究手段结合生物生产技术研发生物医药技术产品，主要包括蛋白质、多肽、抗体、疫苗，以及生物诊断试剂等产品。近年来我国的生物医药领域一直保持着稳定发展速度，也一直占据着生物研究的热点。但是生物制品由于生物过程复杂，影响因素众多，使得生物制品在生产过程中可能引入新的杂质，或者造成生物制品本身结构性质变得不均一。这些因素可能削弱生物药物的疗效，甚至造成生物毒性和机体免疫反应等不良结果。所以生物药物在进入临床测试之前必须经过一系列严格检测来确定生物药物是否合规。百泰派克了解生物制药领域开发所面临的挑战，专注于提供完整的生物药物鉴定和分析服务。

 

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

生物药物表征服务内容

生物药物鉴定服务	产品变异性分析	生物药物纯度分析
高分辨质谱分子量	生物药糖谱检测	SDS-PAGE蛋白质纯度分析
MALDI TOF分子量分析	生物药糖基化位点检测	宿主蛋白残留（HCP）分析服务
生物制药N端测序	生物药二硫键/游离半胱氨酸检测	蛋白质纯度分析（分子筛/反相色谱
生物制药N/C端测序	抗体C端K缺失比例分析	抗体偶联药物（ADCs）
肽段覆盖率/肽谱图分析
蛋白质肽谱图测定
生物药氨基酸组成分析
氢氘交换质谱HDX MS
蛋白质圆二色谱分析

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百泰派克生物科技-生物药物表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP）从事以生物质谱为依托的生物药物表征，大分子物质（包括蛋白质、多肽、代谢物）质谱分析以及小分子物质检测服务。
1、公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；
2、获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；
3、业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；
4、7大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；
5、服务3000+企业，10000+客户的选择；
6、致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!