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TUNEL细胞凋亡两步法检测试
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博士德生物
100T
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡,其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚,时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA被切割,出现单链或双链缺口,并产生与DNA断点数目相同的3’-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将生物素标记的dUTP(BIO-dUTP)标记至3’-OH末端,BIO-dUTP结合在DNA断点部位,再结合链酶亲和素-AP(SABC-AP),BCIP/NBT 予以显示。凋亡的细 胞核呈紫蓝色,从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
1. 标记缓冲液(Labeling Buffer) 5ml
2. 末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20) 100μι
3. BIO-dUTP (×20) 100μι
4. 封闭液(Blocking Reagent) 20ml
5. SABC-AP (× 100) 100μι
6. Proteinase K (×200) 250μι
7.SABC稀释液 20ml
8.BCIP/NBT显色剂(×20) 1ml
9.阳性对照片 2 张
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