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人胃癌细胞

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  • 智立中特
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  • 武汉
  • 2025年07月11日
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      智立中特(武汉)生物科技有限公司

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 运输方式

      常温/冻存

    • 器官来源

      胃癌

    • 细胞形态

      上皮细胞样,


    种属
    人源细胞系/食管、胃、肠、肝、胆
    价格
    询价
    到货周期
    10-15个工作日
    详情描述
    细胞特性
    1)来源:胃癌
    2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
    3)含量:>1x10e6 个/mL
    4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
    5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

    运输和保存:使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状态良好,可进行细胞后续处理操作,按照以下方式进行。若发现可疑污染物,请及时与我们取得联系。

    细胞用途:仅供科研使用。
                           
    细胞培养步骤
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备DMEM-H培养基(添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。(DMEM液体培养基:GIBCO)。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

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