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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
智立中特(武汉)生物科技有限公司
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
常温/冻存
- 器官来源:
胃癌
- 细胞形态:
上皮细胞样,
种属
人源细胞系/食管、胃、肠、肝、胆
价格
询价
到货周期
10-15个工作日
详情描述
细胞特性
1)来源:胃癌
2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
3)含量:>1x10e6 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状态良好,可进行细胞后续处理操作,按照以下方式进行。若发现可疑污染物,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM-H培养基(添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。(DMEM液体培养基:GIBCO)。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
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文献和实验细胞所需的时间就比夏天要长的多。SGC-7901胃癌细胞的消化传代大致步骤同上,但胰酶作用的时候应放在培养箱中,夏天0.1%的胰酶消化2分钟左右就够了,但冬天差不多要8分钟左右MDA-MB-231乳腺癌细胞消化传代基本同MKN-28,只是消化时间可稍长一点,1分钟左右。
本人养胃癌细胞sgc-7901已经半年多了,这半年来,可以说是及其不顺,同门的师哥师姐都说这个细胞很好养,增殖快,传代快,生命力旺盛,不容易感染,然,到我这里似乎就不像他们说的那样,问题接二连三的出现,但我从这一连串的失败中从一个懵懂无知者变成一个动作娴熟的能手,说句实在话还得感谢这批细胞给我带来的宝贵经验。首先我要说一点:无菌操作刚一接手细胞时,无菌相关事项早已耳熟能详,但我的第一批细胞在传第二代时不幸夭折,不明原因,总结一下还应该是操作的问题,被感染,虽没做细菌培养,但还应该是被感染致死
兰州大学第一医院李汛团队首次揭示胃癌演进中mRNA乙酰化修饰新机制
-acetylated COL5A1 研究论文。 图片来源:Springer Nature 官网 该项研究系统阐释了 NAT10 介导的 mRNA 乙酰化修饰促进胃癌细胞上皮 — 间质转化 (EMT) 和转移的机制作用,为通过靶向干预 NAT10 和 ac4C 通路抑制肿瘤演进提供新的策略。 这是国际上关于 mRNA 乙酰化修饰参与癌症进展的机制方面的首个研究成果。 图 1. 本文的科学示意图 研究中,团队成员首先发现 NAT10 在胃癌中表达广泛上调;NAT10 上调与患者预后不良及淋巴结转移密切相关。进一步
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