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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
6个月
- 供应商:
帛科
- 保存条件:
2-8℃冷藏
- 规格:
50管/24样/100管/48样
| 规格: | 50管/24样 | 产品价格: | ¥390.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100管/48样 | 产品价格: | ¥768.0 |
| 产品名称 | 规格 | 实验类型 | 货号 |
| 乳酸含量(LA)生化检测试剂盒 | 50管/24样、100管/48样 | 可见分光光度法、微量法 | BKS2189 |
| 乳酸含量(LA)生化检测试剂盒测定意义 乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量 代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。 测定原理 乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成酸,同时使NAD+还原生成 NADH 和 H +,H +传递给 PMS 生成的 PMSH2还原 INT 生成红色物质,在 530nm 处有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。 |
提取液:液体100mL×2瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加2mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1支,-20℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1支,-20℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加4 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
酶液提取:
①总PGK酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,500g离心5min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体PGK酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液),冰浴匀浆后于4℃,500g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆PGK酶活性,取沉淀加1mL提取液,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,500g离心5min,取上清测定叶绿体中PGK酶活性。
建议测定总PGK酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的PGK,则按照步骤②提取粗酶液。
测定操作
分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
取微量石英比色皿/96孔板,依次加入100μL试剂一,20μL试剂二,10μL试剂三,10μL试剂四,40μL试剂五,20μL粗酶液,充分混匀,记录340nm处10s的吸光值A1和310s的吸光值A2,△A=A1-A2
计算公式
乳酸含量(LA)生化检测试剂盒用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /mg prot)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活单位定义:每克组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /g 鲜重)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.54×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.2mL;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
用96孔板测定的计算公式如下
(1)按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /mg prot)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=643.08×ΔA÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活单位定义:每克组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /g 鲜重)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=643.08×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.2mL;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
公司正在销售的产品:
支链淀粉含量测试盒微量法100管/96样
支链淀粉含量测试盒可见分光光度法50管/48样
脂蛋白酯酶(LPL)测试盒微量法100管/48样
脂蛋白酯酶(LPL)测试盒可见分光光度法50管/24样
脂肪酶(LPS)测试盒微量法100管/96样
脂肪酶(LPS)测试盒可见分光光度法50管/48样
乳酸含量(LA)生化检测试剂盒疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒B Virus(BV)B
双芽巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia bigemina
牛巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia bovis
驽巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia caballi
犬巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia canis
分歧巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia divergens
马巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia equi
吉氏巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia gibsoni
大巴贝虫探针法荧光定量PCR试剂盒Babesia major
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