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线粒体分离和线粒体酶提取生化检测试剂盒

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  • ¥180
  • 帛科
  • BKS2284
  • 国产
  • 2025年07月09日
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      详见说明书

    • 保质期

      6个月

    • 供应商

      帛科

    • 保存条件

      2-8℃冷藏

    • 规格

      50管/48样

    公司产品仅供科研实验,不得用于临床诊断!
    产品名称:线粒体分离和线粒体酶提取生化检测试剂盒
    规格:50管/48样
    产品分类:氧化磷酸化系列
    实验类型:差速离心法
    商品详情:
    线粒体分离和线粒体酶提取生化检测试剂盒测定意义:线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。测定原理:利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。需自备的仪器和用品:超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
    试剂的组成和配制:
    提取液一:液体100mL×1瓶,4℃保存。
    提取液二:液体100mL×1瓶,4℃保存。
    试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;
    试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存;
    试剂三:液体14uL×1支,4℃保存;

     
    产品细节图片1
    产品细节图片2
    产品细节图片3
     
    组织样本的前处理:
    ①总GAPDH酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
    ②胞浆和叶绿体GAPDH酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆GAPDH酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中GAPDH酶活性。
    建议测定总GAPDH酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH,则按照步骤②提取粗酶液。
    细菌或培养细胞的前处理
    先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
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