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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
6个月
- 供应商:
帛科
- 保存条件:
2-8℃冷藏
- 规格:
100管/96样/50管/48样
| 规格: | 100管/96样 | 产品价格: | ¥360.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50管/48样 | 产品价格: | ¥192.0 |
| 产品名称 | 规格 | 实验类型 | 货号 |
| 羟自由基清除能力生化检测试剂盒 | 50管/48样、100管/96样 | 可见分光光度法、微量法 | BKS2185 |
| 羟自由基清除能力生化检测试剂盒测定意义: 羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。 测定原理: H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在510nm处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。 自备实验用品: 恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。 |
提取液:液体100mL×2瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加2mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1支,-20℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1支,-20℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。临用前加4 mL蒸馏水充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
酶液提取:
①总PGK酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,500g离心5min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体PGK酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液),冰浴匀浆后于4℃,500g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆PGK酶活性,取沉淀加1mL提取液,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,500g离心5min,取上清测定叶绿体中PGK酶活性。
建议测定总PGK酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的PGK,则按照步骤②提取粗酶液。
测定操作
分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
取微量石英比色皿/96孔板,依次加入100μL试剂一,20μL试剂二,10μL试剂三,10μL试剂四,40μL试剂五,20μL粗酶液,充分混匀,记录340nm处10s的吸光值A1和310s的吸光值A2,△A=A1-A2
计算公式
羟自由基清除能力生化检测试剂盒用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /mg prot)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活单位定义:每克组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /g 鲜重)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.54×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.2mL;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
用96孔板测定的计算公式如下
(1)按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /mg prot)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=643.08×ΔA÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活单位定义:每克组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
PGK(nmol/min /g 鲜重)=ΔA÷(ε×d)×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=643.08×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.2mL;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.02mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
公司正在销售的产品:
β木糖苷酶生化试剂盒(可见分光光度法)50管/24样可见分光光度法
滤纸酶生化试剂盒(微量法)100管/48样微量法
滤纸酶生化试剂盒(可见分光光度法)50管/24样可见分光光度法
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)生化试剂盒(微量法)100管/96样微量法
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)生化试剂盒(可见分光光度法)50管/48样可见分光光度法
葡萄糖脱氢酶(GCDH)生化试剂盒(微量法)100管/96样微量法
羟自由基清除能力生化检测试剂盒链霉菌通用PCR检测试剂盒Streptomyces spp.PCR
鸡类圆线虫PCR检测试剂盒Strongyloides aviumPCR
无齿类圆线虫PCR检测试剂盒Strongyloides edentatusPCR
马类圆线虫PCR检测试剂盒Strongyloides equinusPCR
乳突类圆线虫PCR检测试剂盒Strongyloides papillosusPCR
猪类圆线虫PCR检测试剂盒Strongyloides ransomiPCR
类圆线虫通用PCR检测试剂盒Strongyloides spp.PCR
布氏锥尾线虫PCR检测试剂盒Subulura brumptiPCR
苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒Sudan Ebola Virus RTPCR
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文献和实验反应形成羟自由基(OH)。后者具有高度活性,导致蛋白、核酸损伤和脂质过氧化。HAS 易受OH损害,使N 末端序列的4个氨基酸发生改变,形成IMA 。有报道,缺血情况下,氨基末端被乙酰化或缺失2 个氨基酸[7,8] 转变为IMA 。在这一过程中,游离Cu2+ 具有很高的毒性作用。游离Cu2+ 释放后,血清白蛋白的N 端序例与其结合,迅速将其清除,当白蛋白在作用下被修辞后,结合Cu2+ 的能力减弱,Cu2+ 从结合位点释放,再次进入OH 形成过程或与正常的白蛋白结合,这就形成一个链式反应,最终使IMA
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人体运动后不可避免地会出现疲劳,机体中大量自由基生成,并导致细胞膜脂质过氧化损伤是疲劳发生的重要机理之一。要想通过运动到达健身的目的,就必须设法减少体内过多的自由基生成或增加机体清除自由基的能力,否则你的健身运动将实得其反,造成对身体的伤害。 1. 什么是自由基? 正常情况下,参与代谢的氧大多数与氢结合生成水,然而有4-5%的氧将被酶所催化形成超氧阴离子,后者又可形成过氧化氢,它们都属于自由基。自由基有多种,如氧自由基和羟自由基 ,是指那些最外层电子轨道
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