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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
说明书
- 供应商:
帛科
- 库存:
32
- 运输方式:
免费快递
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 免疫类型:
说明书
- 物种来源:
人
- 相关疾病:
说明书
- 组织来源:
结肠组织
- 规格:
5×105cells/T25细胞培养瓶
产品名称:人结肠平滑肌细胞
货号:BK-XB1582
规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
商品详情:
产品概述
1.产品名称:人结肠平滑肌细胞
2.组织来源:结肠组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
人结肠平滑肌细胞分离自结肠组织;结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌;结肠运动少而缓慢,对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展,对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平,要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞,由于影响因素单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
5.方法简介:
实验室分离的人结肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
实验室分离的人结肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率每2-3天换液一次
生长特性贴壁
细胞形态成纤维细胞样
传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液0.25%胰蛋白酶
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%
人结肠平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。
5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
细胞培养操作规范:
主要功能:
(1)细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
人体肝癌细胞,YY8103细胞1 x 10^6 cells/T25培养瓶
人体肾脏细胞系,HEK-293T细胞1 x 10^6 cells/T25培养瓶
人外周血嗜碱性白血病细胞,KU812细胞1 x 10^6 cells/T25培养瓶
人微血管內皮細胞株,HMEC-1细胞1 x 10^6 cells/T25培养瓶
人胃癌细胞,AZ-521细胞1 x 10^6 cells/T25培养瓶
人胃癌细胞,HGC-27细胞1 x 10^6 cells/T25培养瓶
人结肠平滑肌细胞大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒 Rat Free Prostate Specific Antigen, fPSA
大鼠前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒 ELISARat prostate specific antigen, PSA
大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA检测试剂盒 Rat ovarian cancer marker-CA125
大鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA KitRat mammary carcinoma Marker-CA153
大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒 Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199
大鼠血红素氧合酶1(HO-1)试剂盒 ELISARat heme oxygenase 1, HO-1
大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA检测试剂盒 Rat Phospholipidase A2, PL-A2
大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA KitRat Tissue factor pathway inhibitor, TFPI
大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒 Rat Aquaporin 5, AQP-5
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
动脉平滑肌细胞 (Arterial smooth muscle cells)
PriCells: 动 脉平滑肌 细 胞 (Arterial smooth muscle cells) 平滑肌分类 尽管体内各器官所含平滑肌在功能特性上判别很大,但一般可分为两大类:一类称为多单位平滑肌,其中所含各平滑肌细胞在活动时各自独立,类似骨骼肌细胞,如竖毛肌、虹膜肌、瞬膜肌(猫)、以及大血管平滑肌等,它们各细胞的活动受外来神经支配或受扩散 到各细胞的激素的影响;另一类称为单位平滑肌,类似心肌组织,其中各细胞通过细胞间的电耦联
实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜
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