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土壤N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(S-NAG)试剂盒,微

板法
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  • ￥1220 - 1950
  • wksubio
  • WS1230W
  • 国内
  • 2026年02月20日
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    • 英文名：

      Soil N-acetyl- β- D-glucosaminidase (S-NAG) Kit

    • CAS号：

      WS1230W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T/96T

    规格：48T产品价格：￥1220.0
    规格：96T产品价格：￥1950.0
    本试剂盒仅供科研使用
    土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（S-NAG）试剂盒说明书
    （货号：WS1230W 微板法 96 样）
    一、产品简介：
    土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG，EC 3.2.1.52）是溶酶体中的一种酸性水解
    酶，由土壤微生物分泌，该酶的活性变化与机体某些病理状态密切相关。
    土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（S-NAG）分解 4-硝基酚-β-N-乙酰氨基葡萄糖生成
    对-硝基*酚（PNP），在 405nm 处检测该产物的升高速率，来计算 S-NAG 活力大小。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    粉剂 mg×2 瓶
    -20℃保存
    临用前甩几下使粉体落入底部，每瓶
    再加 7.6mL 蒸馏水，充分溶解备用，
    用不完的试剂仍-20℃保存；
    试剂二
    液体 80mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂三
    液体 80mL×1 瓶
    4℃保存
    标准品
    粉剂×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、96 孔板、台式离心机、水浴锅或恒温培养箱、可调式移液器、天平。
    四、土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（S-NAG）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本的制备：
    取新鲜土样或干土（风干或者 37 度烘箱风干），先粗研磨，过 40 目筛网备用。
    【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；土壤过筛，保证取样的均匀细腻；
    2、上机检测：
    ① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 405nm。
    ② 在 EP 管中依次加入：
    试剂名称（
    μL）
    测定管
    对照管
    空白管（仅做一次）
    土样（
    g）
    0.05
    0.05
    试剂一
    150
    150
    蒸馏水
    150
    试剂二
    300
    300
    300
    混匀， 37℃（水浴锅或恒温培养箱）振荡反应 1h
    试剂三
    350
    350
    350
    混匀，12000rpm，离心 10min，取上清液 200μL 于 96 孔板中，于
    405nm 下读取吸光值 A，△A=A 测定-A 对照-A 空白（每个测定管
    需设一个对照管）。
    【注】：1.若ΔA 在零附近徘徊，可延长 37℃的孵育时间 T（如增至 4 小时或更长），或增加
    土样质量 W（如增至 0.2g）。则改变后的 T 和 W 需代入计算公式重新计算。
    2.若测定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可缩短 37℃的孵育时间 T（如减至 0.5 小时或更短）。
    则改变后 T 需代入计算公式重新计算。或对最后一步的待检测上清液（包括测定管、对照管本试剂盒仅供科研使用
    2
    和空白管）同时用蒸馏水进行稀释，稀释倍数 D 代入计算公式。
    五、结果计算：
    1、标准曲线：y = 0.0959x - 0.0056；x 为标准品质量（
    μg），y 为吸光值ΔA 。
    2、单位定义：每小时每克土样中产生 1nmol 对-硝基*酚（PNP）定义为一个酶活单位。
    S-NAG 活力(nmol/h/g 土样)=(ΔA+0.0056)÷0.0959÷Mr×103÷W÷T×D
    =75×(ΔA+0.0056) ÷W×D
    T---反应时间，1h；
    W---实际称取土样质量，g；
    Mr--- PNP 相对分子质量，139.11； D---稀释倍数，未稀释即为 1。
    附：标准曲线制作过程：
    1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水。
    2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5mg/mL。也可根据实际
    样本来调整标准品浓度。
    3 在 EP 管中依次加入：20μL 标准品+130μL 蒸馏水+300μL 试剂二+350μL 试剂三，混
    匀，取 200μL 至 96 孔板中，于 405nm 下读取吸光值。
    4 根据结果制作标准曲线。

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