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- 克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 技术资料
- 服务名称：
细胞克隆
- 提供商：
XSL
软琼脂克隆：克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状
实验步骤
实验周期及交付标准
1. 实验周期：1-2周
2. 交付标准：克隆形成图片、计数结果、柱状图、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
细胞克隆化其他方法
1. 稀释铺板方法
2. 饲养层克隆法
3. 毛细管克隆法
4. 荧光激活分选法
细胞克隆 集落形成法/稀释铺板方法
软琼脂克隆法
毛细管克隆法
实验步骤
- 获取样本，培养细胞。
- 调整细胞悬液密度为1×103个/ml细胞。
- 制备底层琼脂，完全溶化的5%琼脂和 37℃ 左右预温的新鲜完全培养液以1：9比例在 40℃ 均匀混合，加入培养皿（直 径 60mm ）中，每皿含0.5%琼脂培养基2ml，室温下琼脂完全凝固。
- 制备上层琼脂,37℃ 密度每皿含200个的细胞悬液1.5ml移入小烧杯中，加入 40℃ 、5%琼脂等体积混匀，即成0.25%半固体琼脂培养基。配好的半固体琼脂培养基立即加入铺有底层琼脂的培养皿中，室温下琼脂凝固。 37℃ 、5%CO2静置培养2- 3周。
- 当培养皿中出现肉眼可见克隆时，终止培养，弃去培养液，PBS液小心浸洗2次，空气干燥。甲醇固定15分钟，弃甲醇后空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟，流水缓慢洗去染液，空气干燥。
实验周期及交付标准
1. 实验周期：1-2周
2. 交付标准：克隆形成图片、计数结果、柱状图、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
细胞克隆化其他方法
1. 稀释铺板方法
2. 饲养层克隆法
3. 毛细管克隆法
4. 荧光激活分选法
细胞克隆 集落形成法/稀释铺板方法
软琼脂克隆法
毛细管克隆法
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