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XSL
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裸鼠皮下移植瘤模型
裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
常见模型
肿瘤类型
细胞系
肺癌 A549,NCH-H358,NCH-H460,NCH-H526, NCH-H1299,NCH-H1650,NCH-H1688,NCHH1975,95-D,PC-10,Calu-3
乳腺癌 MDA-MB-231, MDA-MB-468, MDA-MB-453, HCC70, HCC1954, MDA-MB-361, MCF-7, BT474, BT549, SK-BR-3
胃癌 MKN-28, MKN-45, BGC-823, HGC-27, MKN-28, SCH, SGC-7901, SNU-5, SNU-16, MGC-803, AGS
肝癌 Hep-3B, Huh-7, PLC/PRF/5, QGY-7703, SK-HEP-1, SMMC-7721, HepG-2, BEL-7402, BEL7404, MHCC97H, LM3
胰腺癌 AsPC-1, BxPC-3, Capan-1, Capan-2, CFPAC-1, MIAPaCa-2, PANC-1 肾癌 ACHN, A498, 786-O, OS-RC-2
结直肠癌 COLO 201, COLO 205, DLD-1, HCT-116, HT-29, LoVo, LS1034, LS174T, Caco2, RKO , SW480, SW620, SW1116, SW948
胶质细胞瘤 A172, U87-MG, U251, U343MG, U373, SW1783
常见案例
裸鼠皮下成瘤模型(CDX模型)
模型描述:
常见问题
1.接种量 要查文献来确定接种量,在找不到任何相关资料的情况下,就用到1*107/0.2ml/site,再高也没有意义了。如果你的细胞 很小,1*107/0.1ml也可以操作,不至于很粘稠,那么最好是1*107/0.1ml/site。查文献看他们的构建条件是什么样的,比如 培养条件,接种量,接种位置什么的,是不是一定要用雌性鼠等等。
2.接种部位
腋窝中部外侧皮下为好。皮下肿瘤模型中,想要成瘤率高就接种在腋下。接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针,要 保证与接种点的距离小于针头的长度,向头部方穿行,绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层,当针头到达接种位点时注射,退 出针头。
3.是否用手术标本荷瘤
如果是药效试验,不建议用手术标本,因为SFDA的临床前研究指导原则上明确指出要用建株的肿瘤株进行试验,因为 用手术标本的试验可重复性差。取材的部位:肿瘤生长活跃,状态良好,结缔组织比较少的地方。运送途径:无菌、冰浴保 温,无菌培养液浸泡,时间不能超过1个小时。最好一个小时内就能够接种到动物体内。接种部位:腋下。另外,手术标本 还有一个风险:你不能保证取得的标本一定能够顺利地成瘤并且用于试验。
4.接种时间
最好在1小时之内完成。但在我实际操作过程中,裸鼠的数量又多,1小时之内根本做不完的,所以你可以预先将细胞放 在冰盒里暂为保存。
5.肿瘤倍增时间 肿瘤动物实验模型肿瘤的倍增时间(doubling time),应该是在瘤体积100-800之间计算。
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文献和实验主要分为三类:化学诱导模型、移植瘤模型和基因修饰自发肿瘤模型。 一、化学诱导模型 是指通过注射致癌物质如二甲基苯蒽等诱发小鼠乳腺癌。诱导模型构建简单,诱变剂选择范围大且稳定,诱发成癌率较高,类似于人体肿瘤细胞动力学特征,可用于乳腺癌预防及早期致癌因素的研究。但诱发模型肿瘤发生位点不可预知,同一动物可能有多个肿瘤出现,且肿瘤细胞形态学差异大,不适用于抗癌药物的研究。 二、移植瘤模型 将乳腺癌组织和细胞直接接种于实验动物而建立的模型,在基础研究中应用广泛。根据移植物来源可分为同种移植和异种移植,同种移植动物模型
的治疗效果。 研究团队在建立的皮下胰腺癌肿瘤小鼠模型、原位胰腺癌肿瘤小鼠模型和患者来源的异种移植瘤小鼠中进行实验,可以发现共表达CXCR-6的T细胞相比较而言会表现出增强的瘤内积累,具有更持久的抗肿瘤活性,进而延长动物的生存时间。最后研究团队提出:通过在特异性CAR T细胞上共表达肿瘤特异性的趋化因子受体,是增强获得性免疫疗法治疗实体瘤的一种新策略。 研究团队为了确定胰腺癌小鼠模型中合适的趋化因子靶点,使用QPCR的方法定量不同趋化因子的RNA水平。实时荧光定量PCR(Quantitative Real
Cell Metab:季彤/王旭/孙树洋发现癌痛调控肿瘤发展新机制
性感觉神经,以维持自身旺盛的生长需求。该文不仅为理解癌痛调控肿瘤发展提供了生物学角度的新机制,也提出了使用一类临床偏头痛用药以增强肿瘤饥饿治疗的新策略。 作者以癌痛高发的口腔黏膜恶性肿瘤(口腔黏膜鳞癌与口腔黏膜恶性黑色素瘤)为模型,发现小鼠和人肿瘤微环境中存在密集分布的伤害性感觉神经末梢。通过化学及基因调控小鼠口腔黏膜支配的伤害性感觉神经,作者们发现阻断伤害性感觉神经不仅提升了小鼠的痛阈,更可以显著抑制舌移植瘤的生长。 随后,为了探索伤害性感觉神经调控肿瘤生长的机制,作者们构建了两种体外共培养模型。但出乎
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