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XSL
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动物造模裸鼠皮下移植瘤(只成瘤)
裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
常见模型
肿瘤类型
细胞系
肺癌 A549,NCH-H358,NCH-H460,NCH-H526, NCH-H1299,NCH-H1650,NCH-H1688,NCHH1975,95-D,PC-10,Calu-3
乳腺癌 MDA-MB-231, MDA-MB-468, MDA-MB-453, HCC70, HCC1954, MDA-MB-361, MCF-7, BT474, BT549, SK-BR-3
胃癌 MKN-28, MKN-45, BGC-823, HGC-27, MKN-28, SCH, SGC-7901, SNU-5, SNU-16, MGC-803, AGS
肝癌 Hep-3B, Huh-7, PLC/PRF/5, QGY-7703, SK-HEP-1, SMMC-7721, HepG-2, BEL-7402, BEL7404, MHCC97H, LM3
胰腺癌 AsPC-1, BxPC-3, Capan-1, Capan-2, CFPAC-1, MIAPaCa-2, PANC-1
肾癌 ACHN, A498, 786-O, OS-RC-2
结直肠癌 COLO 201, COLO 205, DLD-1, HCT-116, HT-29, LoVo, LS1034, LS174T, Caco2, RKO , SW480, SW620, SW1116, SW948
胶质细胞瘤 A172, U87-MG, U251, U343MG, U373, SW1783 常见案例 裸鼠皮下成瘤模型(CDX模型)
模型描述:
常见问题
1.接种量
要查文献来确定接种量,在找不到任何相关资料的情况下,就用到1*107/0.2ml/site,再高也没有意义了。如果你的细胞 很小,1*107/0.1ml也可以操作,不至于很粘稠,那么最好是1*107/0.1ml/site。查文献看他们的构建条件是什么样的,比如 培养条件,接种量,接种位置什么的,是不是一定要用雌性鼠等等。
2.接种部位 腋窝中部外侧皮下为好。皮下肿瘤模型中,想要成瘤率高就接种在腋下。接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针,要 保证与接种点的距离小于针头的长度,向头部方穿行,绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层,当针头到达接种位点时注射,退 出针头。
3.是否用手术标本荷瘤 如果是药效试验,不建议用手术标本,因为SFDA的临床前研究指导原则上明确指出要用建株的肿瘤株进行试验,因为 用手术标本的试验可重复性差。取材的部位:肿瘤生长活跃,状态良好,结缔组织比较少的地方。运送途径:无菌、冰浴保 温,无菌培养液浸泡,时间不能超过1个小时。最好一个小时内就能够接种到动物体内。接种部位:腋下。另外,手术标本 还有一个风险:你不能保证取得的标本一定能够顺利地成瘤并且用于试验。
4.接种时间 最好在1小时之内完成。但在我实际操作过程中,裸鼠的数量又多,1小时之内根本做不完的,所以你可以预先将细胞放 在冰盒里暂为保存。
5.肿瘤倍增时间 肿瘤动物实验模型肿瘤的倍增时间(doubling time),应该是在瘤体积100-800之间计算。
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文献和实验于裸鼠皮下生长的人胃癌组织,在形态、功能、生化特征等方面与人胃癌十分相似,但因其周围有结缔组织包裹,即便是选用高转移性的肿瘤,也仅仅形成局部肿瘤,限制了其浸润及转移。原位移植模型则能够克服这一限制,结果表明移植瘤发生局部浸润、淋巴结转移及远处它脏转移,且转移率较高,部分有腹水形成,而且较好地保持了原始肿瘤的组织结构和细胞形态、功能、生化特征,转移的发展也具有与临床胃癌患者基本一致的规律,与皮下移植模型比较具有显著优越性。许多学者认为肿瘤转移不仅与其生长环境有关(土壤学说),还取决于其本身的转移
的位置,45 度斜角进针,注意不要突破腹膜,将针头保持于皮下位置。然后近水平位置将针头几乎完全插入皮下,将混有基质胶的肿瘤细胞注射入皮下(肿瘤细胞量约 1x106),快速退针,左手食指轻压针孔约 1 min 后将小鼠放回饲养笼中,注意将小鼠侧放于垫料上,放置其不适呕吐时呕吐物误入呼吸道引起窒息。2~3 h 后观察小鼠是否苏醒。如果是利用肿瘤组织(人体肿瘤标本或小鼠移植瘤传代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,则需要首先将肿瘤组织用无菌 PBS(或 1640 培养基)洗涤 3 次,然后在无菌平皿上切成或用无菌
%,Mccutcheon对脑膜瘤进行的颅内移植实验也获得了成功。颅内移植最大的问题在于难以连续观测肿瘤的生长情况。Medhkour等认为裸鼠的肾包膜下血供丰富,不易发生免疫反应,故提出将脑肿瘤移植于此,但需多次切开裸鼠肾包膜进行观察,易发生感染或死亡,而且会对肿瘤的生长产生影响。裸鼠皮下移植模型操作简单,便于观察,是目前应用最为广泛的方法。Jensen等将脑膜瘤细胞悬液移植于40只裸鼠皮下,所形成皮下肿瘤的组织学特征和细胞增殖特性与人类脑膜瘤相似。Malham分别采用细胞悬液和肿瘤组织块进行了皮下移植实验,发现
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