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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
Recombinant Mouse C3
- 保质期:
说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
- 规格:
50μg/200ug/1mg
| 规格: | 50μg | 产品价格: | ¥4440.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200ug | 产品价格: | ¥8100.0 |
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥25920.0 |
| 产品名称 | Recombinant Mouse C3 |
| 货号 | P-Db1716 |
| 规格 | 50μg, 200μg, 1mg |
| 种属 | Mouse |
| 宿主 | Yeast |
| 表达区间 | 1321-1663 |
| 分子量 | 37.6 kDa |
| 标签 | N-terminal His Tag |
| 纯度 | Greater than 95% as determined by SDS-PAGE |
| 应用 | Western Blot, ELISA |
| 性状 | Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 |
| 溶解方法 | Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex |
| 存储 | -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
| 别名 | Acylation stimulating protein cleavage product, AHUS5, ARMD9, ASP, C3, C3 and PZP like alpha 2 macroglobulin domain containing protein 1, C3 and PZP-like alpha-2-macroglobulin domain-containing protein 1, c3 complement, C3adesArg, CO3_HUMAN, Complement C3, Complement C3 alpha chain |
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
特点:
Recombinant Mouse C3生物素标记:生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。
酶标记:酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高。
荧光标记:荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一,产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光, 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
公司正在销售的产品:
TNFRSF9 Protein Human 重组人 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His & Fc 标签)
PACAP-27/38 腺苷酸环化酶激活肽-27/38(抗原 0.5mgPACAP-27/38 腺苷酸环化酶激活肽-27/38(抗原)
HA重组甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签) Protein
TNFRSF1B Protein Human 重组人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 标签)
LCN1重组人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 蛋白 (His 标签) Protein
IL13RA1 Protein Mouse 重组小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 标签)
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原
GHR重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
CAT Protein Human 重组人 CAT / Catalase 蛋白 (His 标签)
AKR1A1重组人 AKR1A1 蛋白 (His 标签) Protein
Recombinant Mouse C3FKBP1A重组人 FKBP12 蛋白 (His 标签) Protein
神经颗粒素(NRGN)重组蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)
LPAL2重组人 LPAL2 蛋白 (Fc 标签) Protein
IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 标签)
HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
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文献和实验Purification and Characterization of Human and Mouse Complement C3
. This chapter describes the purification of C3 from human and mouse plasma using protein precipitation, followed by classical ion exchange chromatography and gel filtration. The biochemical and functional characteristics of the purified C3 are typically assessed
with a Ca2+ -free medium or with trypsin/dispase. The latter facilitates the introduction of recombinant or trappable probes and microimaging studies of, for example, changes in cytosolic-free Ca2+ concentration or the dynamics of individual organelles
2基因有关,例如, C3H系与 AKR系二者都为 H- 2k ,但其它基因则不同,例如 T细胞特异抗原的 Thy 1抗原,在 C3H为 Thy 1. 2,而 AKR为 Thy 1. 1,然而只将 AKR的 Thy 1. 1用 C3H的 Thy 1. 2置换成的 AKR-Thy 1. 2与原来的 AKR系对 Thy 1抗原之外的基因来说是同族系。关于形成同族鼠,以 Thy 1抗原为例,用 C3H与 AKR交配,以后以 Thy 1. 2抗原之有无为指标,与 AKR回交( 10世代以上),这样在 Thy
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