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青枯雷尔氏菌PCR试剂盒

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  • ¥1990
  • XKbio
  • XK-P7382
  • 国产
  • 2025年07月16日
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      100

    • 英文名

      Ralstonia solanacearum

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      50次

    青枯雷尔氏菌PCR试剂盒
    英文名称:Ralstonia solanacearum
    青枯雷尔氏菌呈长椭圆形,近杆状,革兰氏阴性菌,菌体大小为 0.5-0.8x1.3- 2.2 微米极生鞭毛 1-4 根,不形成荚膜和芽孢。菌体内均有聚-β-羟基丁酸盐颗 粒,在电子显微镜或显微镜下显示两极着色较深的特征。细菌性青枯病分布和危 害细菌性青枯病是一种由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的毁灭 性土传病害,主要分布在热带、亚热带和温带地区,在我国南方各省市均有严重 发生。青枯雷尔氏菌可危害 44 个科的 300 余种植物。因此快速检测青枯雷尔氏 菌具有重要意义。本产品就是以荧光定量 PCR 技术为基础开发的专门检 测青枯雷尔氏菌的试剂盒。

    产品细节图片1

    产品特点:

    1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
    2. 引物等组分经过优化,灵敏度高。
    3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
    4. 特异性高,引物是根据青枯雷尔氏菌 DNA 高度保守区设计,不会跟其他微 生物的 DNA 发生交叉反应。
    5. 既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5 个数量级。
    6. 本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应。
    7. 本产品只能用于科研。

    青枯雷尔氏菌PCR试剂盒包装规格及成分:

    编号

    成分

    规格

    试剂一

    PCR MagicMix 3.0 1 mL(红盖)

    试剂二

    超纯水 1 mL(亮黄色)

    试剂三

    青枯雷尔氏菌 PCR 引物混合液 100 μL(白盖)

    试剂四

    青枯雷尔氏菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) 50 μL(黄盖)

    试剂五

    使用手册 1 份

    运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。

    自备试剂:DNA 模板

    产品细节图片2

     

    使用方法:

    一、样品 DNA 的制备
    1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
    2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 青枯雷尔氏菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
    二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
    3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

    成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照
    PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
    青枯雷尔氏菌 PCR 引物 混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
    N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL    
    PCR 阴性对照(水)   18 μL  
    PCR 阳性对照(青枯雷尔氏菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液)     18 μL

    4. 按下表设置 PCR 反应:

    过程 温度 时间
    预变性 95℃ 5 min
    PCR 反应 (35 个循环) 95℃ 30 sec
    55℃ 30 sec
    72℃ 30 sec
    最后延伸 72℃ 7 min


    三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
    产品细节图片3

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    图标文献和实验
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    图标技术资料

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