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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Ralstonia solanacearum
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
英文名称:Ralstonia solanacearum
青枯雷尔氏菌呈长椭圆形,近杆状,革兰氏阴性菌,菌体大小为 0.5-0.8x1.3- 2.2 微米极生鞭毛 1-4 根,不形成荚膜和芽孢。菌体内均有聚-β-羟基丁酸盐颗 粒,在电子显微镜或显微镜下显示两极着色较深的特征。细菌性青枯病分布和危 害细菌性青枯病是一种由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的毁灭 性土传病害,主要分布在热带、亚热带和温带地区,在我国南方各省市均有严重 发生。青枯雷尔氏菌可危害 44 个科的 300 余种植物。因此快速检测青枯雷尔氏 菌具有重要意义。本产品就是以荧光定量 PCR 技术为基础开发的专门检 测青枯雷尔氏菌的试剂盒。

产品特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 引物等组分经过优化,灵敏度高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据青枯雷尔氏菌 DNA 高度保守区设计,不会跟其他微 生物的 DNA 发生交叉反应。
5. 既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5 个数量级。
6. 本产品足够 50 次 20μL 体系的染料法荧光定量 PCR 反应。
7. 本产品只能用于科研。
青枯雷尔氏菌PCR试剂盒包装规格及成分:
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 |
青枯雷尔氏菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 |
青枯雷尔氏菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(黄盖) |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。
自备试剂:DNA 模板

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 青枯雷尔氏菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 青枯雷尔氏菌 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照(水) | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照(青枯雷尔氏菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。

青枯雷尔氏菌PCR试剂盒相关产品:
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 青枯雷尔氏菌LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 青枯雷尔氏菌PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 青枯雷尔氏菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
| 鲍疱疹样病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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文献和实验水稻细菌性基腐病是由菊基腐欧氏菌玉米致病变种侵染引起的细菌性病害。 [诊断]水稻细菌性基腐病一般在分蘖至灌浆期发生,分蘖期可出现零星病株,病株茎基部的叶鞘上产生水渍状病斑,逐渐向上扩展,形成边缘深褐色、中间枯白色的不规则大病斑,茎基部变灰黑色,有时节间出现黑褐色纵条斑,严重病株先从心叶青枯卷曲,最后枯黄,似螟虫造成的“枯心”状。病害后期病株茎基部和根部变黑并逐渐腐烂,地上部自上而下逐渐枯死。有时病株基部茎节上长出倒生根。病株易齐泥拔断,洗净后用手挤压可见乳白色混浊细菌菌脓溢出
一个完整的分类系统。 本纲细菌有些是人类和动物的致病菌,如引起霍乱的霍乱弧菌、引起伤寒的伤寒沙门氏菌、引起脑膜炎的脑膜炎奈瑟氏球菌、引起多种动物流产的布鲁氏菌、引起人和动物钩端螺旋体病的钩端螺旋体、引起人和动物多种脓肿的拟杆菌;有些是植物的致病菌,如引起蔫萎的黄单胞菌、引起青枯病的青枯假单胞菌、引起软腐病的胡萝卜软腐欧文氏菌等。有的可用于工农业生产,如用于湿法冶金的氧化硫硫杆菌、与豆科植物共生固氮的根瘤菌;有的可用于污水处理,如动胶菌、球衣菌和排硫硫杆菌等。
植物细菌病害的症状常作为鉴定属的一种辅助性状,即症状类型和病原属之间有一定的相关性,如棒杆菌属的细菌主要引起萎蔫症状;假单胞杆菌属主要引起叶斑,腐烂和萎蔫症状;黄单胞杆菌属主要引起叶斑和叶枯症状;野杆菌属引起瘤肿等增生性症状;欧氏菌属一般引起软腐,有时也引起萎蔫。此外,多数细菌病害在发病初期,特别在潮湿的自然条件下常呈水浸状或油渍状;在饱和湿度下病斑上常有菌脓形成,干后成为菌痂,掌握症状类型(附1)及其形成的生态条件,对细菌病害的正确诊断是十分重要的。观察下列病害标本,区分症状类型。水稻白叶枯病
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