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文献和实验Single tube confirmation PCR protocol
50 µl total volume *10 x Taq buffer contains: 100 mM Tris-HCl (pH 8.4), 500 mM KCl, 15 mM MgCl2. *The final concentrations are shown in parentheses. *The Taq Polymerase should be added last and PCR mixture should be kept on ice
Purification of Plasmid from 50 ml-culture
1. Shake E. coli harboring plasmid at 37 C overnight in 50 ml of TB containing appropriate antibiotics. (when using ampicillin, addition of the antibiotics to 100-200 ug/ml rather than usual 50 ug/ml may improve the yield of plasmids.)
的，您认为国产的四季清可不可以用。您也不用HS吗？还有，洗涤离心除去胰蛋白酶是多少转多少分呢？几次？我的细胞传代后老是不长是否就是因为有胰蛋白酶没有终止干净呢？ 我用PC12测试药物，用MTT的方法。96孔板，每孔100微升，100000个/ml的浓度。接种后24h给药，再过24h后是否就应该到了对数增长期了？ 丁香园drcici的回答： PC12是生存能力比较强的一种细胞株，用国产or进口的血清，加不加HS均可（这几种我都用过），不过HS更适于神经元的生长，FBS较利于增殖。另外据我所知，国产
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