葡聚糖G-100

层析技术概念、原理、分类（凝胶层析和离子交换层析）

等。 葡聚糖凝胶介质是由多聚葡聚糖与环氧绿丙烷交连而成。最常用的葡聚糖凝胶层析介质是Sephadex G系列，不同型号的凝胶用G表示，G代表交联度，从G10到G100。“G”后面的数字表示每10g干胶的吸水量，可根据待分离混和物分子量大小选用不同“G”值的凝胶。 2.  分离过程： 样品随洗脱液的流动下移 3.  影响凝胶柱层析的主要因素 （1）层析柱的选择与装填 层析柱的大小应根据分离样品量的多少及对分辨率的要求而定。凝胶柱填装后用肉眼观察应均匀

葡聚糖凝胶过滤法测定蛋白质分子量方法

蛋白 图4.4 Ve / V0对log MW作图 试剂和器材 一、试剂洗脱液：0.05M Tris-HCl缓冲液(pH7.5)，0.1M KCl溶液：称取12.12g Tris，15g KCl，先用少量去离子水溶解，再加入6.67mL浓HCl，用去离子水定容至2L。 蓝色葡聚糖2000；Sephsdex G-100；N-乙酰酪氨酸乙酯饱和溶液(以洗脱液饱和)。 二、材料 牛血清白蛋白(Mr 67 000)；卵清蛋白(Mr 43 000

IPTG 诱导蛋白表达实验

℃ 继续培养3 -5h ;如果表达载体的原核启动子为tac 等,则37 ℃培养细菌数小时达到对数生长期后加IPTG 至终浓度为1 mmol / L.继续培养3 -5h . ( 5 )取上述培养液1 mL , 1000g 离心,1 min ,沉淀,加100 μL 聚丙烯酰胺凝胶电泳上样缓冲液后,作SDS -PAGE 检测. 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白质纯化： 细菌的裂解 常用方法有：① 高温珠磨法;② 高压匀浆;③ 超声破碎法;④ 酶溶法;⑤ 化学