AAT Bioquest36314 Screen Quest

AAT Bioquest36314 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 1Plate

美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

我们北京云肽生物科技有限公司作为AAT Bioquest公司的特约经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定，折扣好的服务标准。

AAT Bioquest36314 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 1Plate，产品简介：
产品品牌：AAT Bioquest
产品货号：36314
产品名称：Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit
产品规格：1Plate

产品说明：

校正系数 （260 nm） 1.076

校正系数 （280 nm） 0.769

消光系数（厘米-1M-1) 23430

激发（纳米） 495

发射（纳米） 516

量子产率 0.161

钙通量测定是药物发现中筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的*选方法。Screen Quest™ Fluo-8 NW钙检测试剂盒提供了一种基于荧光的均质检测试剂盒，用于检测细胞内钙动员。表达通过钙发出信号的目标GPCR的细胞预装了我们专有的Fluo-8 NW，它可以穿过细胞膜。Fluo-8 NW是可用于HTS筛查的最亮的钙指示剂。一旦进入细胞，Fluo-8 AM的亲脂性封闭基团被非特异性细胞酯酶切割，导致带负电荷的荧光染料留在细胞内，并且其荧光在与钙结合时大大增强。当细胞用筛选化合物刺激时，受体发出细胞内钙释放的信号，这大大增加了Fluo-8 NW的荧光。其波长长、灵敏度高和荧光增加 100-250 倍（当它与钙形成复合物时）的特点使 Fluo-8 NW 成为测量细胞钙的理想指标。该 Screen Quest Fluo-8 NW 钙检测试剂盒提供了一种优化的检测方法，用于监测 G 蛋白偶联受体 （GPCR） 和钙通道。该测定可以以方便的 96 孔或 384 孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。

组件
组件 A：Fluo-8 NW                  1 瓶，冻干
组件B：10X Pluronic® F127 Plus     1 瓶 （1 mL）
组分C：HHBS(Hanks' buffer with 20 mM Hepes)     1 瓶 （9mL）

示例协议

协议摘要
 

1. 在含有1-5%FBS的生长培养基中制备细胞
2. 加入 Fluo-8 NW 染料上样溶液（100 孔板为 96 μL/孔，25 孔板为 384 μL/孔）
3. 在室温下孵育1小时
4. 监测Ex/Em = 490/525 nm处的荧光强度

重要说明
在开始实验之前，请在室温下解冻所有组分。

储备液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

1. Fluo-8 NW储备溶液：
将20 μL（用于货号#36314）或200μL（用于货号#36315和#36316）的DMSO加入Fluo-8 NW（组分A）的小瓶中，并充分混合。 注意：20 μL Fluo-8 NW 储备溶液足以用于一个板。未使用的Fluo-8 NW储备溶液可以等分并储存在< -20oC超过一个月，如果管子密封严密。避光避光，避免反复冻融循环。

2. 检测缓冲液 （1X）：
a） 用于猫。 # 36314（1 个板套件）和 # 36315（10 个板套件），通过将 1 mL HHBS（组分 C）加入 9X Pluronic® F10 Plus（127 mL，组分 B）中制成 1X 检测缓冲液，并将它们充分混合。
b） 对于 Cat. # 36316（100 板套件），通过将整瓶 1 X Pluronic F10 Plus（127 mL，组分 B）加入 10 mL HHBS 缓冲液（未包含在试剂盒中）中，并充分混合，制成 90X 测定缓冲液。注意：10 mL 的 1X 测定缓冲液足以用于一个板。将未使用的1X测定缓冲液等分并储存在< -20^®oC. 避光，避免反复冻融循环

工作溶液的制备
Fluo-8 NW 染料上样溶液：
将 20 μL Fluo-8 NW 储备溶液加入 10 mL 1X 测定缓冲液中，并充分混合。注意：该工作溶液在室温下可稳定至少2小时。

实验方案样本

1. 将 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 Fluo-8 NW 染料负载溶液添加到细胞板中。[我们为那些喜欢保留培养基去除步骤的人提供 2 个单独的培养基去除钙检测试剂盒（Cat.# 36308 和 36309）。

 

1. 将染料上样板在细胞培养箱中孵育30分钟，然后在室温下再孵育板30分钟。注意：如果检测需要 37^oC、立即进行实验，无需进一步室温孵育。注意：如果细胞在室温下可以长时间很好地发挥作用，请将细胞板在室温下孵育1-2小时（建议孵育时间不超过2小时）。

 

1. 用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。

 

1. 通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来运行钙通量测定。注意：在实验之前运行信号测试很重要。不同的仪器都有自己的强度范围。将信号测试强度调整到最大仪器强度计数的10%至15%的水平。例如，FLIPR-384的最大荧光强度计数为65，000，因此应调整仪器设置，使信号测试强度在7，000至10，000左右。

产品订购信息：

品牌	货号	产品名称	规格
AAT Bioquest	36314	Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit	1 Plate
AAT Bioquest	36315	Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit	10 Plates

以下是AAT Bioquest品牌部分产品订购信息，如需其他产品请联系本店客服

品牌	货号	产品名称	单位
AAT Bioquest	22906	Cell Meter™ Fluorimetric Cellular Lipid Peroxidation Assay Kit	200 Tests
AAT Bioquest	22970	Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit*Optimized for Flow Cytometry*	100 Tests
AAT Bioquest	22971	Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit*Optimized for Microplate Reader*	200 Tests
AAT Bioquest	23000	Cell Meter™ Autophagy Assay Kit *Blue Fluorescence*	200 Tests
AAT Bioquest	23002	Cell Meter™ Autophagy Assay Kit *Green Fluorescence*	200 Tests
AAT Bioquest	23010	Cell Meter™ Cell Adhesion Assay Kit	100 Tests
AAT Bioquest	23500	Cell Meter™ 2-NBDG Glucose Uptake Assay Kit	200 Tests
AAT Bioquest	36310	Cell Meter™ Flow Cytometric Calcium Assay Kit	100 Tests
AAT Bioquest	36312	Cell Meter™ No Wash and Probenecid-Free Endpoint Calcium Assay Kit *Optimized for microplate reader*	100 Tests
AAT Bioquest	36314	Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit	1 Plate
AAT Bioquest	36315	Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit	10 Plates
AAT Bioquest	36317	Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit	1 Plate
AAT Bioquest	36318	Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit	10 Plates
AAT Bioquest	60000	ReadiPrep™ Nuclear/Cytoplasmic Fractionation Kit	50 Tests
AAT Bioquest	60006	Amplite® Fluorimetric Endotoxin Detection Kit	100 Tests
AAT Bioquest	60500	ReadiUse™ Bio-Gel P-6 spin column	5
AAT Bioquest	71020	iFluor® 350 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71021	iFluor® 405 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71023	iFluor® 488 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71028	iFluor® 555 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71029	iFluor® 594 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71030	iFluor® 633 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71031	iFluor® 647 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71048	iFluor® 546 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71049	iFluor® 568 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71052	iFluor® 430 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71368	iFluor® 790 succinimidyl ester	100 ug
AAT Bioquest	71560	iFluor® 647 succinimidyl ester	10 mg