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- KA&M-BIO
- 上海
- MZ24126
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 英文名：
pCR4-TOPO-ST18(1点插入)(human)
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 规格：
管
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCR4-TOPO-ST18(1点插入)(human)圻明公司现货供应，可按客户需求单独构建载体，
一、载体构建：
(1)目的DNA片段和载体的制备；
(2)目的DNA片段和载体的连接；
(3)连接产物的转化；
(4)克隆筛选。
(5)测序验证及目标质粒交付
二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建，如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体；报告基因载体等；
2、基因定点突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；
3、载体元件替换和改造；
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建；
5、过表达载体构建。
详询客服。公司整合了国外数个基因库资源，具有以下优势：
种属齐全：人、小鼠、大鼠、其它种属；
数量众多：多达几万数量cDNA克隆（cDNA模板质粒）和ORF克隆（ORF表达质粒）；
质量优异：保证目的基因序列正确，无氨基酸突变，每个克隆质粒均可提供相应的测序报告；
价格实惠：与您亲自调取基因相比，我们的服务让您更加省时、省力、省心；
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pCR-XL-TOPO-BZRAP1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-FAM38A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-POC5(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ZNF404(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-TRIM60(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-NT5C1A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-RGL4(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ANKRD23(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-PLEKHN1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-XL-TOPO-SLIT1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ETV1(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
pCR-BluntII-TOPO-ANKDD1A(human) 大肠杆菌 基因模板 cDNA 人 Kan
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文献和实验【精华】vol 687 Chapter 3 采用Splinkerette-PCR技术对前病毒基因组插入位点进行分离
, Murine leukemia virus, PCR, Oncogene,Tumor suppressor gene, Leukemia 1. Introduction With the whole genome sequences of human and major modelorganisms available, biological processes can be explored in anunprecedented way – questions
TOPO克隆提供高效的一步法克隆策略，可以定向克隆平端PCR产物到入门载体。平端PCR产物定向克隆的效率>90%，从而简化了筛选。同时不再需要连接酶、PCR后续步骤或者限制性内切酶。目前有两种定向TOPO克隆载体。pENTR/D-TOPO 和pENTR/SD/ D-TOPO（表2和图3）有以下特点： 位于PCR产物插入位点两侧的attL重组位点可以与Gateway目的载体进行有效重组 通用M13位点便于测序 基于pUC的ori位点提供高产量质粒 大肠杆菌中卡那霉素（kanamycin
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含
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