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- xybio
- XY-sh0611
- 上海
- 2025年07月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
/
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
50管/24样
分光光度法50管/24样
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在碱性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
测定原理：
碱性条件下，S-ALPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配置：
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入6ml蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入2mL试剂七，沸水浴加热溶解，然后加入8ml试剂一，充分混匀备用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入40ml蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；
试剂六：液体1.5mL×1支，0.05mg/ml标准酪氨酸溶液；
试剂七：液体5mL×1瓶，4℃保存；
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
测定操作：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
2、试剂二、三和四40℃水浴10min。
3、样本测定：
| 试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
| 风干土样（g） | 0.04 | 0.04 |
| 试剂一（μL） | 300 | |
| 试剂三（μL） | 300 |
| 试剂二（μL） | 100 | 100 |
| 测定管 | 对照管 | 标准管 | |
| 上清液（μL） | 150 | 150 | |
| 试剂六（μL） | 150 | ||
| 试剂四（μL） | 700 | 700 | 700 |
| 试剂五（μL） | 150 | 150 | 150 |
注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-ALPT活性计算：
单位定义：每天每g土样中产生1mg酪氨酸为一个 S-ALPT活力单位。
S-ALPT(mg/d/g土样)=C标准×(A测定管-A对照管)÷A标准管×V反总÷W÷T=24×(A测定管-A对照管)÷A标准管
C标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V反总：反应体系总体积，0.4mL；T：反应时间，30min=1/48d； W：样本质量，0.04g
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文献和实验) 式中：X——样品的酶活力，u/g(u/mL); A——试样溶液的平均吸光度; K——吸光常数; 8——反应试剂的总体积，mL; 2——吸取酶液2.00mL，以1min计; 1/10——反应时间10min，以1min计; n——稀释倍数 E——紫外法与福林法的换算系数(中性、碱性蛋白酶系数为0.50;酸性蛋白 酶系数为0.77)。 所得结果表示至整数。 7 结果的允许差
酶活力。本实验以BAEE为底物，用紫外吸收法测定胰蛋白酶活力。酶活力单位的规定常因底物及测定方法而异。 从动物胰脏中提取胰蛋白酶时，一般是用稀酸溶液将胰腺细胞中含有的酶原提取出来，然后再根据等电点沉淀的原理，调节pH以沉淀除去大量的酸性杂蛋白以及非蛋白杂质，再以硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原等(包括大量的酸性杂蛋白以及非蛋白杂质，再以硫酸铵分级盐析将胰蛋白酶原等(包括大量糜蛋白酶原和弹性蛋白酶原)沉淀析出。经溶解后，以极少量活性胰蛋白酶激活，使其酶原转变为有活性的胰蛋白酶(糜蛋白酶和弹性蛋白酶
的方法有 a. 双硫腙比色法测定铅、锌、铜、汞 b. 原子吸收分光光度法 c. 离子选择电极测铅 d. 极普法测铅 一）１．原理双硫腙与某些金属离子形成络合物容于氯仿，四氯化碳等有机物溶剂中，在一定的 平 H 值下，双硫腙可与不同的金属离子呈现出不同的颜色，在加入掩蔽剂和其他消除干扰的试剂后调节 平 H ＝８ . ５ - ９ . ０时铅
