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土壤α葡萄糖苷酶(Sα GC)测试盒(可见分光光度法)

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  • 上海
  • 2025年07月22日
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    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      详见说明书

    • 规格

      50管/24样

    土壤α-葡萄糖苷酶(Solid-α-Glucosidase,S-α-GC)试剂盒说明书
                                         分光光度法50/24

       意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
    测定意义:                           
    S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

    测定原理:
    S-α-GC能够催化对-硝-基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝-基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。

    自备用品
    可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)蒸馏水
    试剂组成和配制
    试剂一甲苯5mL×1瓶,4保存;(自备)
    试剂粉剂×2瓶,-20保存;临用前每瓶加入6mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20保存
    试剂三:液体25mL×1瓶,4保存; 
    试剂:液体50mL×1瓶,4保存;

    样品处理
    新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

    测定步骤:
    试剂名称 测定管 对照管
    风干土样(g 0.05 0.05
    试剂一(μL 25 25
      室温振荡混匀15min 90℃振荡混匀15min
    试剂二(μL 400  
    蒸馏水(μL   400  
    试剂三(μL 500 500  
    混匀, 37振荡反应1h立即90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失)流水冷却10000g 25℃离心10min,取上清液
    上清液μL 500 500
    试剂四μL 1000 1000
    充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A计算ΔA=A测定管-A对照管每个测定管设一个对照管。

    S-α-GC活力计算:
    标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

    单位的定义:每天g土样中产生1 μmol-硝-基苯酚定义为一个酶活力单位。
    S-α-GC活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027)
    T:反应时间,1h=1/24d V反总:反应体系总体积9.25×10-4 LW:样质量,0.05g
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