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- xybio
- XY-sh0514
- 上海
- 2025年07月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
/
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
100管/48样
微量法100T/48S
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
测定原理：
β-木糖苷酶催化对硝-基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝-基苯酚，对硝-基苯酚在405nm处有特征吸收峰，测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体1mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心20min，取上清待测。
细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
液体：直接检测。
测定操作表：
- 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至405nm。
- 操作表
| 对照管 | 测定管 | |
| 酶液（μL） | 40 | 40 |
| 试剂一（μL） | 10 | |
| 试剂二（μL） | 80 | 70 |
| 混匀，45℃水浴20min | ||
| 试剂三（μL） | 80 | 80 |
| 混匀，静置5min，405nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 | ||
β-木糖苷酶活性计算公式：
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、按蛋白浓度计算
酶活定义：45℃，pH7.4时每毫克蛋白1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷（V样×Cpr）÷T×1000
= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按样本质量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4时每克样品1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鲜重）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按细胞数量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4时每104个细胞1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万个）÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
酶活定义：45℃，pH7.4时每毫升液体1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷V样÷T×1000
=11.34×(ΔA-0.0011)
V样总：加入提取液体积，1mL； V反总：反应总体积，0.12mL；V样：反应中样品体积，0.04mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样品质量，g；T：反应时间，20min；1000:1μmol/L=1000nmol/L
- 用96孔板测定的计算公式如下
1、按蛋白浓度计算
酶活定义：45℃，pH7.4时每毫克蛋白1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷（V样×Cpr）÷T×1000
= 22.68×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按样本质量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4时每克样品1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鲜重）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T×1000= 22.68×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按细胞数量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4时每104个细胞1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万个）÷T×1000=22.68×(ΔA-0.0011) ÷ 细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
酶活定义：45℃，pH7.4时每毫升液体1min内催化产生1 nmol对硝-基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷V样÷T×1000
=22.68×(ΔA-0.0011)
V样总：加入提取液体积，1mL； V反总：反应总体积，0.12mL；V样：反应中样品体积，0.04mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样品质量，g；T：反应时间，20min；1000:1μmol/mL=1000nmol/mL
ΔA控制在0.01-1范围内，若ΔA大于1，可适当减小样本量。
标准曲线线性范围为：0.01μmol/mL-0.5μmol/mL
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文献和实验提示我模型中的通路究竟涉及哪个亚型，而我又没有那么多经费一个一个亚型去试，故我想能不能就检测总的PKC激活水平，毕竟有亚型被激活，那总的活化PKC水平也应该会升高啊！虽然敏感性和特异性肯定没有单独检测一个亚型的高。 还想请教：Phospho-PKC (pan) (gamma Thr514) Antibody 和Phospho-PKC (pan) (βII Ser660) Antibody 这两个抗体的针对的亚型有什么不同？既然都是pan，那是否说都是针对所有的亚型，只是磷酸化的残基不同
）1-3. 传统上，生物材料中兽药残留由微生物和免疫组化技术进行分析4。而这些方法可以为特定类别的化合物提供一种快速经济的筛查方法，每种测试盒一般仅对一种化合物有效，对模糊物质的鉴定缺乏选择性，且结果仅近似定量。至于阳性结果，政府法规部门通常要求更加精确的色谱分析方法以确定抗生素的存在及含量。 由于MRLs相关法规变得更加严格，发展定量方法以及确认和鉴定技术以使假阳性结果最小化就更为重要。飞行时间质谱法（TOF MS）筛查具有一定的优势，如历史数据追踪、简化仪器方法设定和在增加化合物数量时
分装 F0175 巨噬细胞游走抑制因子(MIF) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0176 巨噬细胞炎性蛋白-1 a (MIP-1 a ) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0177 巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0178 巨噬细胞炎性蛋白-1r(MIP-1r) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口
