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100
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上海信帆生物科技有限公司
- 抗体英文名:
HRP*Polyclonal Goat Anti-Tree shrew IgG(H+L)
辣根过氧化物酶(HRP)是一种含亚铁血红素的蛋白质,广泛分布于植物界,以在辣根中含量高而得名,分子质量约为40KDa。HRP作为酶标记抗体是通过共价键经适当的方法将酶联接在抗体上,形成酶标抗体后再通过酶对底物的特异性催化作用,生成有色不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,利用肉眼、光学显微镜或电子显微镜可对结果进行观察。
HRP由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,该酶的活性中心含铁卟啉即辅基,在403nm波长处呈现最高吸收峰,酶蛋白部分吸收波长为275nm,HRP的纯度为二者的吸光度比值RZ[1] ,该酶与抗体标记的方法有多种,根据酶的结构可分为戊二-醛两步法和过碘-酸钠法两种方式标记抗体。
FITC异硫青酸荧光素是一种常用的标记抗体的方法。FITC一般为黄色。棕色或棕色粉末或结晶,在低温下可保存数年。在碱性条件下,FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。抗体分子最多可标记15~20个FITC分子。标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力,在荧光源紫外线或蓝紫光的刺激下产生黄绿色荧光,通过荧光显微镜观察或使用流细胞仪进行分析,从而定性、定位或定量抗原。
一般每个抗体可以标记3-5个生物素,标记时,生物素与抗体的比率受抗体浓度影响,对于10 mg/ml 的抗体溶液来说,生物素应超过蛋白12倍(摩尔数),对于2 mg/ml 的抗体溶液应超过20倍,
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
E L I S A w i t h p l a t e l e t s
for 1 hour with a 1 :1000 dilution of rat IgG2 a anti-mouse kappa chain monoclonal antibody conjugated to horse-radish peroxidase (LO-MK1 , LO/IMEX) reveal with o-phenylenediamine dihydrochloride (OPD) in revelation solution. SOLUTIONS
位于小鼠第 17对染色体(第 1X连锁群)上,是决定小鼠主要组织亲和性抗原 H-2抗原表达的基因。一个小鼠个体的 H-2抗原包括许多抗原的复合体,它至少和 H-2K、 H-2G、 H-2D三个基因座位有关。 H- 2K和 H-2D位于两端,它们之间的交换率为 0.5%。由于在 H-2基因座位内包含有免疫应答基因( Ir)、补体第四成分基因( Ss)、雄特有蛋白质基因( Slp)等,因此 H-2基因又称为 H-2复合体( H-2 complex)(见图)。此外已经明确在哺乳动物的精子、桑椹
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