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北京云肽生物科技有限公司
产品名称:Gibco 25200-072 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶,含EDTA,含酚红)
产品货号:25200-072
产品规格:500ml
产品单位:0
产品说明:
这种胰蛋白酶的液体配方含有EDTA和酚红。Gibco胰蛋白酶EDTA是由胰蛋白酶粉制成的,胰蛋白酶粉是一种来自猪胰腺的蛋白酶的辐照混合物。由于其消化能力,胰蛋白酶被广泛用于细胞分离、常规细胞培养传代和原代组织分离。分离所需的胰蛋白酶浓度随细胞类型和实验要求而变化。请参阅Gibco胰蛋白酶溶液的完整范围和推荐的解离条件。
该胰蛋白酶溶液含:
•乙*胺四乙酸
•酚红
质量检测
Gibco胰蛋白酶溶液的酸碱度、渗透压、无菌性和性能都进行了测试。此外,在制造前,对原料进行电子束辐照验证,并测试其内毒素、ppv、pcv 1/2、支原体、细菌、真菌和病毒污染,以及多活性分析、灰分分析和水分分析。
记录的可追溯性
我们可以提供详细的文件以满足您的监管需求。Gibco胰蛋白酶信息包括批次可追溯性、动物来源证书、批次分析、辐照证书、病毒灭活总结和供应链透明度。
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文献和实验一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
变形后,吸出胰酶直接加入适量的hanks液或者全培,这个量看自己的喜好和吹打细胞方便而定。一般都可以中止消化的。不会存在继续消化的事情。如果是从组织上消化细胞做原代培养,我一般都使用全培进行中止,而且加的很多,0.25%的胰酶,用10%血清,按1:2的比例应该是足够的。当然全培是2,一般我养细胞的时候,会用国产的比较便宜的血清配制全培,专门用于中止消化,这样有几个好处:一是中止消化的效果应该好于hanks液吧,再是也有利于维持细胞活性。而且这部分液体会被离心去掉,血清便宜,离心掉了不会心疼。而养细胞
d细胞达90%融合时传代。(4)传代培养:传代时先全部吸出培养液后,用无Ca2+ 、Mg2+PBS液洗涤二次,加入37℃预热的0.25%(2.5g/L,0.25%)胰蛋白酶(含1mmol/L EDTA,即用1mmol/L-EDTA-Na2配制)消化1~2分钟,吸去胰酶,以残留的胰酶继续消化,倒置显微镜下观察,细胞开始皱缩时(细胞开始变圆)加入完全培养液(3ml左右)终止胰酶作用。吸管反复吹打后将细胞收集于15ml离心管中,1500r/min 离心10分钟后弃上清,再用PBS液洗涤二次彻底洗去混
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