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- xybio
- XY-sh0379
- 上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
80
- 英文名：
/
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
100管/96样
微量法100T/96S
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
测定原理：
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。
自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、甲苯80mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体65mL×2瓶，4℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡20min。
试剂三：甲苯80mL×1瓶，4℃保存（自备）。
试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存。
标准品：液体10 μL×1瓶，10 µmol/mL的标准溶液，4℃保存。临用前加入3.168 mL甲苯，充分溶解。
粗酶液提取：
- 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。12000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
- 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后12000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
- 血清等液体: 直接检测。
LPS测定操作：
- 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到710 nm，蒸馏水调零。
- 试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min。
- 在1.5mL EP管中依次加入下列试剂
| 试剂名称（μL） | 空白管 | 测定管 |
| 蒸馏水 | 150 | |
| 样本 | 50 | |
| 试剂一 | 300 | 300 |
| 试剂二 | 100 |
| 试剂三 | 800 | 800 |
| 试剂名称（μL） | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
| 上清液 | 400 | 400 | |
| 标准品 | 400 | ||
| 试剂四 | 100 | 100 | 100 |
注意：空白管和标准管只需测定一次。
LPS活性计算公式：
1. 组织、细菌或细胞LPS活性
（1）按照蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (μmol/min/mg prot) = [C标准品×(A测定管-A空白管)÷（A标准- A空白管）]×V反总÷（Cpr×V样）÷T
=16×[(A测定管－A空白管)÷（A标准管- A空白管）]÷Cpr
（2）按照样本质量计算
活性单位定义：37℃中每克组织每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (μmol/min/g 鲜重) = [C标准品×(A测定管-A空白管)÷（A标准管- A空白管）]×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
=16×[(A测定管－A空白管)÷（A标准管- A空白管）]÷W
（3）按照细菌或者细胞数量计算
活性单位定义：37℃中每104个细胞每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (μmol /min/104cell) = [C标准品×(A测定管-A空白管)÷（A标准管- A空白管）]×V反总÷（细胞数量×V样÷V样总）÷T
=16×[(A测定管－A空白管)÷（A标准管- A空白管）]÷细胞数量
2. 血清等液体LPS活性
活性单位定义：37℃中每毫升血清每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (μmol /min/mL) = [C标准品×(A测定管－A空白管)÷（A标准管- A空白管）]×V反总÷V样÷T
=16×[(A测定管－A空白管)÷（A标准管- A空白管）]
C标准品：10 µmol/mL；V反总：反应总体积，0.8mL；V样：反应中加入样本体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL，需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。
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文献和实验脂肪酶（Lipase, LPS）是一组特异性较低的脂肪水解酶类，主要来源于胰腺，其次为胃及小肠，能水解多种含长链脂肪酸的甘油酯。通常胰腺以等量分泌脂肪酶及共脂肪酶进入循环，但因共脂肪酶相对分子量较小，可以从肾小球滤出，急性胰腺炎时，共脂肪酶/脂肪酶比例下降。测定方法有滴定法、电极法、比浊法、分光光度计法及荧光光度计法。 1．正常参考值： 偶联法健康成人脂肪酶活性：1～54 U/L
【摘要】 急性胰腺炎是多种病因导致胰酶在胰腺内被激活后引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应。目前实验室多以血清淀粉酶检查辅助临床诊断，但由于淀粉酶来源特异性不高，单用淀粉酶检测辅助诊断有失偏颇。联合脂肪酶检测，可提高诊断的灵敏度和特异性，且具有100%的阴性预测值，拥有很好的诊断意义和巨大的临床价值。 【临床相关简介】 急性胰腺炎是多种病因导致胰酶在胰腺内被激活后引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应。临床
，在一定的条件下被激活，引起相应的生理或病理变化。） （二）非血浆特异酶 在血浆中浓度很低，且无功能，分为两种。 1.分泌酶： 来源于消化腺或其他外分泌腺的酶。如α～淀粉酶（AMY）、前列腺酸性磷酸酶（ACP）、脂肪酶（LPS）、胃蛋白酶原、胰蛋白酶原、ALP等。 正常体液中外分泌酶活性低而稳定，不发生催化作用。 在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，来源增医学教育网整理加或排泄受阻时，血浆中此类酶活性增高。例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会
