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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
Recombinant Rat IGFBP1
- 保质期:
说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
- 规格:
50μg/200μg/1mg
| 规格: | 50μg | 产品价格: | ¥4440.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200μg | 产品价格: | ¥8100.0 |
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥25920.0 |
公司产品仅供科研实验,不得用于临床诊断!
商品详情:
注意事项:
1. 分装量的多少取决于每次试验的使用量。分装量不少于 10μl;分装量越少,由于蒸发和吸附于管内壁而引起的损失会越大。
2. 避免使用无霜冰箱来保存重组蛋白。
3. 解冻后的分装重组蛋白应保存于 4℃,一般可以保存1-2周。
4. 稀释至工作浓度的重组蛋白最好不要在 4℃保存超过一天时间。
5. 冷冻保存的蛋白溶液,在使用之前应室温解冻,确认充分溶解,没有结块后使用。
6. 取用溶液时避免反复多次吹打蛋白溶液,以免引起不必要的活性损失。
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Recombinant Rat IGFBP1Listeriolysin中文名称: 李斯特菌溶胞素抗体标记: Unconjugated
ECM1中文名称: 细胞外基质蛋白1抗体交叉反应: Human
HES4中文名称: 转录因子HES4抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep
应用类型: IVD原料���英文名称: beta-Amyloid (1-42)英文别名: beta-Amyloid(1-42); A4; AAA; ABETA; ABPP; AD1; Alzheimers Disease Amyloid Protein; Amyloid B; Amyloid Beta A4 Protein Precursor; Amyloid Beta; Amyloid of Aging and Alzheimer Disease; APP; APPI; B Amyloid; Beta APP; Cerebral Vascular Amyloid Peptide; CTFgamma; CVAP; PN II; PN2; PreA4; Protease nexin II; A beta; Amyloid 1-42.
Mafa中文名称: v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
ZNF212中文名称: 锌指蛋白212抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit
操作步骤:
(一)获得目的基因
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
3、人工合成法:依照检索到的目的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过重叠延伸PCR法拼接出全长,这种方法无需模板,是目前常用的获取基因的手段之一。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三)获得含重组表达质粒的表达菌种
1、将连接产物转化大肠杆菌,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
(四)诱导表达
1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。
2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中,37℃震荡培养至OD600 ≌0.4-1.0(最好0.6,大约需3hr)。
3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。
4、分别取菌体1ml,离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀,70℃10min。
5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
商品详情:
| 产品名称 | Recombinant Rat IGFBP1 |
| 货号 | A-01K100666 |
| 规格 | 50μg, 200μg, 1mg |
| 种属 | Rat |
| 宿主 | E.Coli |
| 表达区间 | 26-272 |
| 分子量 | 27.1 kDa |
| 标签 | N-terminal His Tag |
| 纯度 | Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses |
| 应用 | Western Blot, ELISA |
| 性状 | Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 |
| 溶解方法 | Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex |
| 存储 | -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
| 别名 | AFBP, Alpha pregnancy associated endometrial globulin, Amniotic fluid binding protein, Binding protein 25, Binding protein 26, Binding protein 28, Growth hormone independent binding protein, hIGFBP 1, hIGFBP1, IBP 1, IBP-1, IBP1, IBP1_HUMAN, IGF binding protein 1 |
1. 分装量的多少取决于每次试验的使用量。分装量不少于 10μl;分装量越少,由于蒸发和吸附于管内壁而引起的损失会越大。
2. 避免使用无霜冰箱来保存重组蛋白。
3. 解冻后的分装重组蛋白应保存于 4℃,一般可以保存1-2周。
4. 稀释至工作浓度的重组蛋白最好不要在 4℃保存超过一天时间。
5. 冷冻保存的蛋白溶液,在使用之前应室温解冻,确认充分溶解,没有结块后使用。
6. 取用溶液时避免反复多次吹打蛋白溶液,以免引起不必要的活性损失。
公司正在热销的产品:
甲硫氨酰tRNA合成酶2(MARS2)重组蛋白英文名称:Recombinant Methionyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (MARS2)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)重组蛋白英文名称:Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)感染免疫
芳香酶(ARO)重组蛋白英文名称:Recombinant Aromatase (ARO)肿瘤免疫
核糖核酸酶A2(RNASE2)重组蛋白英文名称:Recombinant Ribonuclease A2 (RNASE2)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
尿苷胞苷激酶1(UCK1)重组蛋白英文名称:Recombinant Uridine Cytidine Kinase 1 (UCK1)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
牛痘相关激酶2(VRK2)重组蛋白英文名称:Recombinant Vaccinia Related Kinase 2 (VRK2)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
溶血磷脂酶Ⅲ(LYPLA3)重组蛋白英文名称:Recombinant Lysophospholipase III (LYPLA3)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
亮氨酰tRNA合成酶2(LARS2)重组蛋白英文名称:Recombinant Leucyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (LARS2)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
泛素样修饰激活酶6(UBA6)重组蛋白英文名称:Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 6 (UBA6)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
Lipidosin蛋白(LPD)重组蛋白英文名称:Recombinant Lipidosin (LPD)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
Recombinant Rat IGFBP1Listeriolysin中文名称: 李斯特菌溶胞素抗体标记: Unconjugated
ECM1中文名称: 细胞外基质蛋白1抗体交叉反应: Human
HES4中文名称: 转录因子HES4抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep
应用类型: IVD原料���英文名称: beta-Amyloid (1-42)英文别名: beta-Amyloid(1-42); A4; AAA; ABETA; ABPP; AD1; Alzheimers Disease Amyloid Protein; Amyloid B; Amyloid Beta A4 Protein Precursor; Amyloid Beta; Amyloid of Aging and Alzheimer Disease; APP; APPI; B Amyloid; Beta APP; Cerebral Vascular Amyloid Peptide; CTFgamma; CVAP; PN II; PN2; PreA4; Protease nexin II; A beta; Amyloid 1-42.
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1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
3、人工合成法:依照检索到的目的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过重叠延伸PCR法拼接出全长,这种方法无需模板,是目前常用的获取基因的手段之一。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三)获得含重组表达质粒的表达菌种
1、将连接产物转化大肠杆菌,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
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3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。
4、分别取菌体1ml,离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀,70℃10min。
5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
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