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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
Recombinant Human MMP3
- 保质期:
说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
- 规格:
50μg/200μg/1mg
| 规格: | 50μg | 产品价格: | ¥3300.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200μg | 产品价格: | ¥6300.0 |
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥18900.0 |
公司产品仅供科研实验,不得用于临床诊断!
商品详情:
注意事项:
1. 分装量的多少取决于每次试验的使用量。分装量不少于 10μl;分装量越少,由于蒸发和吸附于管内壁而引起的损失会越大。
2. 避免使用无霜冰箱来保存重组蛋白。
3. 解冻后的分装重组蛋白应保存于 4℃,一般可以保存1-2周。
4. 稀释至工作浓度的重组蛋白最好不要在 4℃保存超过一天时间。
5. 冷冻保存的蛋白溶液,在使用之前应室温解冻,确认充分溶解,没有结块后使用。
6. 取用溶液时避免反复多次吹打蛋白溶液,以免引起不必要的活性损失。
公司正在热销的产品:
丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)重组蛋白英文名称:Recombinant Protease, Serine 2 (PRSS2)物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌, 细胞外基质预测分子量:26kDa
鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重组蛋白英文名称:Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMPD4)物种:Homo sapiens (Human,人)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌预测分子量:19.1kDa
甘氨酸C乙酰转移酶(GCAT)重组蛋白英文名称:Recombinant Glycine C Acetyltransferase (GCAT)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌预测分子量:22.1kDa
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Recombinant Human MMP3ASFV p30中文名称: 非洲猪瘟p30蛋白抗体标记: Unconjugated
应用类型: Other英文名称: CAMK4英文别名: Brain Ca(2+) calmodulin dependent protein kinase type 4; Brain Ca(2+) calmodulin dependent protein kinase type IV; Calcium / calmodulin dependent protein kinase type 4 catalytic chain; Calcium / calmodulin dependent protein kinase type IV catalytic chain; Calcium/calmodulin dependent protein kinase IV; Calcium/calmodulin dependent protein kinase type IV; CAM kinase 4; CAM kinase GR; CAM kinase IV; CaMK 4; CAMK GR; CaMK IV; CaMK4; CaMKGR; MGC36771.
LONP2中文名称: Lon蛋白酶2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog
PNKP中文名称: 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Sheep
Phospho-TRIM28 (Ser824)中文名称: 磷酸化转录中介因子Tif1β抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
PPT2中文名称: 棕榈酰蛋白水解酶2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
操作步骤:
(一)获得目的基因
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
3、人工合成法:依照检索到的目的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过重叠延伸PCR法拼接出全长,这种方法无需模板,是目前常用的获取基因的手段之一。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三)获得含重组表达质粒的表达菌种
1、将连接产物转化大肠杆菌,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
(四)诱导表达
1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。
2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中,37℃震荡培养至OD600 ≌0.4-1.0(最好0.6,大约需3hr)。
3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。
4、分别取菌体1ml,离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀,70℃10min。
5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
商品详情:
| 产品名称 | Recombinant Human MMP3 |
| 货号 | A-01K100339 |
| 规格 | 50μg, 200μg, 1mg |
| 种属 | Human |
| 宿主 | E.Coli |
| 表达区间 | 101-477 |
| 分子量 | 41.4 kDa |
| 标签 | N-terminal His Tag |
| 纯度 | Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses |
| 应用 | Western Blot, ELISA |
| 性状 | Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 |
| 溶解方法 | Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex |
| 存储 | -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
| 别名 | CHDS6, Matrix metalloproteinase 3, Matrix metalloproteinase 3 preproprotein, Matrix metalloproteinase-3, MGC126102, MGC126103, MGC126104, MMP 3, MMP-3, MMP3, MMP3_HUMAN, Proteoglycanase, SL-1, SL1, STMY, STMY1, STR1, Stromelisin 1, Stromelysin 1, Stromelysin 1 progelatinase, Stromelysin-1, Transin 1, Transin-1 |
1. 分装量的多少取决于每次试验的使用量。分装量不少于 10μl;分装量越少,由于蒸发和吸附于管内壁而引起的损失会越大。
2. 避免使用无霜冰箱来保存重组蛋白。
3. 解冻后的分装重组蛋白应保存于 4℃,一般可以保存1-2周。
4. 稀释至工作浓度的重组蛋白最好不要在 4℃保存超过一天时间。
5. 冷冻保存的蛋白溶液,在使用之前应室温解冻,确认充分溶解,没有结块后使用。
6. 取用溶液时避免反复多次吹打蛋白溶液,以免引起不必要的活性损失。
公司正在热销的产品:
丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)重组蛋白英文名称:Recombinant Protease, Serine 2 (PRSS2)物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌, 细胞外基质预测分子量:26kDa
鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重组蛋白英文名称:Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMPD4)物种:Homo sapiens (Human,人)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌预测分子量:19.1kDa
甘氨酸C乙酰转移酶(GCAT)重组蛋白英文名称:Recombinant Glycine C Acetyltransferase (GCAT)物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌预测分子量:22.1kDa
羧肽酶A5(CPA5)重组蛋白英文名称:Recombinant Carboxypeptidase A5 (CPA5)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌预测分子量:-实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
岩藻糖基转移酶5(FUT5)重组蛋白英文名称:Recombinant Fucosyltransferase 5 (FUT5)物种:Homo sapiens (Human,人)来源:原核表达宿主E.coli内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)亚细胞定位::分泌预测分子量:40.4kDa
Recombinant Human MMP3ASFV p30中文名称: 非洲猪瘟p30蛋白抗体标记: Unconjugated
应用类型: Other英文名称: CAMK4英文别名: Brain Ca(2+) calmodulin dependent protein kinase type 4; Brain Ca(2+) calmodulin dependent protein kinase type IV; Calcium / calmodulin dependent protein kinase type 4 catalytic chain; Calcium / calmodulin dependent protein kinase type IV catalytic chain; Calcium/calmodulin dependent protein kinase IV; Calcium/calmodulin dependent protein kinase type IV; CAM kinase 4; CAM kinase GR; CAM kinase IV; CaMK 4; CAMK GR; CaMK IV; CaMK4; CaMKGR; MGC36771.
LONP2中文名称: Lon蛋白酶2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog
PNKP中文名称: 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Sheep
Phospho-TRIM28 (Ser824)中文名称: 磷酸化转录中介因子Tif1β抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
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1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
3、人工合成法:依照检索到的目的基因序列,设计合成相互重叠的单链寡核苷酸,再通过重叠延伸PCR法拼接出全长,这种方法无需模板,是目前常用的获取基因的手段之一。
(二)构建重组表达载体
1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三)获得含重组表达质粒的表达菌种
1、将连接产物转化大肠杆菌,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
(四)诱导表达
1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。
2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中,37℃震荡培养至OD600 ≌0.4-1.0(最好0.6,大约需3hr)。
3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。
4、分别取菌体1ml,离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀,70℃10min。
5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
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