Gal LDH测定操作: 1. 分光光度计预热30 min,调节波长到550nm,蒸馏水调零。 2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min。 3. 依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL上清液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三,迅速混匀后于550nm比色,记录10s和130s的吸光值A1和A2,△A=A2﹣A1。
Gal LDH活性计算公式: (1). 按蛋白浓度计算 Gal LDH活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟还原1nmol Cyt c 为1个酶活单位。 Gal LDH (nmol/min/mg prot) = △A÷ε÷d×V反总×109÷(Cpr×V样)÷T =289×△A ÷Cpr (2). 按样本质量计算 Gal LDH活性单位定义:25℃中每克样品每分钟还原1nmol Cyt c 为1个酶活单位。 Gal LDH (nmol/min/g鲜重) = △A÷ε÷d×V反总×109÷(W×V样÷V样总)÷T =289×△A ÷W