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- 国产
- 2025年09月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Leishmania donovani PCR Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
英文名称：Leishmania donovani PCR Kit
利什曼原虫是一种胞内寄生原虫, 由媒介昆虫白蛉传播。寄生人体的利什 曼原虫主要有杜氏利什曼原虫、硕大利什曼原虫、墨西哥利什曼原虫、巴西 利什曼原虫等, 其中, 杜氏利什曼原虫引起的黑热病症状最重, 致死率极高。 本产品是根据 PCR 原理开发的杜氏利什曼原虫检测试剂盒。
产品特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据杜氏利什曼虫保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
杜氏利什曼虫(黑热病病原虫)PCR试剂盒包装规格及成分：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
杜氏利什曼虫PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
杜氏利什曼虫PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。
自备试剂：DNA 模板
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 杜氏利什曼虫 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 杜氏利什曼虫 PCR 引物 混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
| PCR 阴性对照（水） | 18 μL | ||
| PCR 阳性对照（杜氏利什曼虫 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 （35 个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
杜氏利什曼虫(黑热病病原虫)PCR试剂盒相关产品：
| 产品名称 |
方法 |
产品规格 |
价格 |
| 杜氏利什曼虫LAMP试剂盒 | LAMP |
50次 |
2490 |
| 杜氏利什曼虫PCR试剂盒 | PCR |
50次 |
1990 |
| 杜氏利什曼虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 |
50次 |
2490 |
| 杜氏利什曼虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 |
50次 |
2990 |
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文献和实验佚名 杜氏利什曼原虫引起人与动物的杜氏利什曼原虫病，又称黑热病。在印度，患者皮肤上常有暗的色素沉着，并有发热，故又称Kala-azar，即黑热的意思。 一、人是怎么得黑热病的？ 黑热病（Kala--azar）又称内脏利什曼病(Visceral Leishmaniasis)，是由杜氏利什曼原虫引起、经白蛉传播
由杜氏利什曼原虫引起的慢性地方性传染病，白蛉为传染媒介。杜氏利什曼原虫主要寄生在人体内脏网状内皮系统，有时也侵犯皮肤网状内皮系统。其生活史分为两个阶段：利杜体阶段和前鞭毛体阶段。本病的主要传染源是病人、病犬或患病的野生动物。主要传播媒介为中华白蛉。当白蛉叮咬病人或病犬时，吸入含有利杜体的网状内皮细胞，进入白蛉胃内 3日后发育成前鞭毛体，含有前鞭毛体的白蛉再次叮咬人时，使人体感染。发病年龄以青少年为主，成年中男性多于女性。病后可获得持久的免疫力。人体感染杜氏利什曼原虫后，该虫
寄生在人体网状内皮细胞中，能引起黑热病，故又称黑热病原虫。我国长江以北有此病流行。此虫最早于1900年发现于印度。利什曼原虫的生活史有两个阶段，一段寄生于人或狗体内，另一段寄生于一种昆虫——白蛉体内，故黑热病是靠白蛉吸血而传播的。利什曼原虫在人体的巨噬细胞内，呈近圆形小体，只有2～3微米长，无鞭毛。可在细胞内进行二分裂生殖，破坏巨噬细胞，导致肝脾肿大，发烧，贫血，死亡率很高。当白蛉吸病人血时，利什曼原虫即进入白蛉的消化道内，逐渐变为梭形小体，长15～20微米，前端具一鞭毛
